化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1233 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 實(shí)驗(yàn)動物的正常骨髓血組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
詳細(xì)介紹
大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 1×106 |
商品貨號 | A01X1233 |
細(xì)胞詳述
內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,在生理或病理因素刺激下,可從骨髓動員到外周血參與損傷血管的修復(fù)研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路。
內(nèi)皮祖細(xì)胞具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。
該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
注意事項： 收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基，不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常骨髓血組織。
2) 細(xì)胞鑒定：CD31和CD34免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長方式：長梭狀，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人椎間盤髓核細(xì)胞 | MG63人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
大腦發(fā)育同源蛋白2抗體 | PE-Cy7標(biāo)記的細(xì)胞分化蛋白SEP1抗體 |
MDA-MB-157人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的2型腎上腺皮質(zhì)增生癥蛋白抗體 |
MDA-MB-157人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體 |
MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的Endokinin-A/B抗體 |
MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的磷化轉(zhuǎn)移生長因子β受體2抗體 |
MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的巨噬細(xì)胞甘露糖受體CD206抗體 |
MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的磷化凋亡相關(guān)蛋白4抗體 |
MDA-MB-231+LUC人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的T淋巴細(xì)胞識別鱗狀細(xì)胞癌抗原2抗體 |
MDA-MB-231+LUC人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的真核翻譯起始因子3F抗體 |
MDA-MB-361人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的22號染色體開放閱讀框29抗體 |
MDA-MB-361人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化PE-Cy7標(biāo)記的白介-1受體拮抗劑抗體 |
MDA-MB-415人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的DULLARD蛋白抗體 |
MDA-MB-415人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的磷化微管相關(guān)蛋白抗體 |
MG63人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的MAS1癌基因抗體 |
化工儀器網(wǎng)