化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X2248 | 主要用途 | 科研 |
| 組織來(lái)源 | 臍帶組織 | 種屬來(lái)源 | 兔 |
詳細(xì)介紹
兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng) | 兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X2248 |
組織來(lái)源 | 臍帶組織 | 種屬來(lái)源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
包被條件：PLL(0.1mg/ml)，明膠(0.1%)
傳代特性：可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
傳代比例：1:2
細(xì)胞簡(jiǎn)介：兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤(pán)，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺(tái)中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠牙齦上皮細(xì)胞 | 人角膜內(nèi)皮細(xì)胞 |
基質(zhì)金屬蛋白-9單克隆抗體 | PE-Cy3標(biāo)記的組蛋白賴(lài)氨N-甲基NSD3抗體 |
人外周血巨噬細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的腺瘤樣息肉抗體 |
人脾臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的CD6抗體 |
人Treg細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的蛋白激C亞性D型抗體 |
人淋巴結(jié)成纖維細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的FBXL14蛋白抗體 |
人骨髓肥大細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子1抗體 |
人牙周膜成纖維細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的FOXI3蛋白抗體 |
人牙周膜干細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 |
人牙髓干細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的口蹄疫病毒抗體 |
人口腔黏膜上皮細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的透明帶結(jié)合蛋白2抗體 |
人牙齦成纖維細(xì)胞 | 兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞PE-Cy3標(biāo)記的染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體 |
人角膜上皮細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 |
人晶狀體上皮細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的內(nèi)皮細(xì)胞清道夫受體抗體 |
人根尖牙乳頭干細(xì)胞 | PE-Cy3標(biāo)記的嘌呤霉敏感性氨肽蛋白抗體 |
化工儀器網(wǎng)