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細胞名稱  水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S5培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞系來源于一雌性河川型水牛與沼澤型水牛雜交后代的耳部皮膚組織，2010年由中科院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P2

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類
水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S5培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S5培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
Anti-phospho-Cyclin E(Thr62) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素E抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC 熒光素標記磷酸化單絲氨酸蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Caspase-1(actived P10) 天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體 規(guī)格 0.1ml

Emp1 (epithelial membrane protein 1) 表皮膜蛋白1抗原 0.5ml

HCST 英文名稱： 造血細胞信號轉導蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SIPA1 信號誘導增殖相關蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC 熒光素標記磷酸化單絲氨酸蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit 人白介素受體相關激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-NCX2/SLC8A2 鈉鈣交換蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-31 白細胞介素31抗體 規(guī)格 0.2ml

MIP-3 Beta/ELC/CCL19 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β 96T

PIG3 英文名稱： p53誘導蛋白3抗體 0.2ml

CD66c 英文名稱： 癌胚抗原相關細胞粘附分子抗體 0.1ml

Anti-NCX2/SLC8A2 鈉鈣交換蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/PE PE標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml

Guanylyl Cyclase alpha 2 英文名稱： 鳥苷酸環(huán)化酶α2/GCS-α-2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AQP2 水通道蛋白-2抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-IL-3/FITC (mouse, rat) 熒光素標記白介素3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Mink IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗水貂IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-PPIG/FITC 熒光素標記親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S5培養(yǎng)Anti-Phospho-Ret (Tyr905) /FITC 熒光素標記磷酸化指狀蛋白RET抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-phosphor-LKB1(Ser428) /FITC 熒光素標記磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CASD1/C7orf12 第七號染色體開放閱讀框12抗體 規(guī)格 0.2ml

ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內皮素轉化酶1抗原 0.5mg

Hepatitis C Virus genotype 1a NS5 英文名稱： 丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Sidekick 2 細胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-phosphor-LKB1(Ser428) /FITC 熒光素標記磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S5培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。