詳細介紹
細胞名稱 人胚肺細胞系;KuMA培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
人胚肺細胞系;KuMA培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
人胚肺細胞系;KuMA培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人胚肺細胞系;KuMA培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-p300/KAT3B/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Rabbit IgG/Biotin 生物素化羊抗兔IgG(H+L)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
抗I型膠原抗體 Anti-Collagen I 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
Bovine Fibrinogen 英文名稱: 纖維蛋白原抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PID1 磷酸相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Goat Anti-Rabbit IgG/Biotin 生物素化羊抗兔IgG(H+L)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-APEX1/Ref-1 /FITC 熒光素標記氧化還原因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM71A FAM71A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
MDH1 英文名稱: 可溶性蘋果酸脫氫酶抗體 0.1ml
AXUD1 英文名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱酸和絲酸富含核蛋白1) 0.2ml
Anti-APEX1/Ref-1 /FITC 熒光素標記氧化還原因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶LMTK3(Serine/threonine-protein kinase LMTK3)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)ELISA試劑盒,英文名:TN-C ELISA KiISA Kit for Human Retinol-binding protein 1大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒,英文名:TNFβ ELISA Kit人神經(jīng)內(nèi)分泌蛋白7B2(Neuroendocrine protein 7B2)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠血管非炎性蛋白1(VNN1)ELISA試劑盒,英文名:VNN1 ELISA KiISA Kit for Human Sclerostin大鼠斯鈣素1(STC1)ELISA試劑盒,英文名:STC1 ELISA Kit人含硬化蛋白域1(SOSTDC1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)ELISA試劑盒,英文名:F13A1 ELISA KiISA Kit for Human Transmembrane protease serine 4大鼠腱蛋白(CHRD)ELISA試劑盒,英文名:CHRD ELISA Kit人TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP-43)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠谷胱甘肽過氧化酶1(GPX1)ELISA試劑盒,英文名:GPX1 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor-related protein 6大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒,英文名:GMP-140 ELISA KiISA Kit for Human Uromodulin大鼠蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)ELISA試劑盒,英文名:ZPI ELISA Kit人無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)ELISA試劑盒人96T1.57-100 ng/mL大鼠白介素1δ(FIL1δ)ELISA試劑盒,英文名:FIL1δ ELISA Kit大鼠cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒,英文名:CREB ELISA Kit豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒,英文名:LTB4 ELISA Kit人細胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)ELISA試劑盒,英文名:PDGF-AA ELISA Kit人伯胺氧化酶膜(Membrane primary amine oxidase)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒,英文名:Renin ELISA Kit
兔抗山羊 IgG(H+L)/FITC 0.1ml 綠色熒光,Jackson公司分裝
VAMP3 英文名稱: 囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-BAD(Ser128) 磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體 規(guī)格 0.1ml
Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)血清白蛋白:納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DLL1 英文名稱: Notch信號通路Delta樣配體1抗體 0.1ml
Anti-Activated protein C 活化蛋白C抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人胚肺細胞系;KuMA培養(yǎng)HSP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit 人熱休克蛋白40Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HPV33 E7 人類狀瘤病毒33抗體 規(guī)格 0.2ml
28S rRNP(Human 28S ribosome RNP antibody) ELISA Kit 人28S抗核糖體抗體 96T
PEA15 英文名稱: 星形膠質(zhì)細胞PEA15抗體 0.2ml
CEP76 英文名稱: 中心體蛋白質(zhì)76抗體 0.2ml
Anti-PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml