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細胞名稱  人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞

品牌 貼壁生長

特征特性 腫瘤抑制基因： p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳瘤病毒的18(HPV-18)進行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE

培養(yǎng)條件 這株細胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分： 角化細胞無血清培養(yǎng)基K-SFM，kit目錄號17005-042。隨kit提供這株細胞生長所需的兩種添加劑（牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長因子EGF）。 配制*生長培養(yǎng)基，需添加以下成分： 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。

傳代方法 消化3-5分鐘。1：

2。3天內(nèi)可長滿。  

傳代情況 P(52+5)

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Beta-CG ELISA Kit 大鼠絨毛膜促性腺激素βMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽 1-40 C端抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉頭蛋白O1/O3/O4抗體 規(guī)格 0.2ml

cath-K ELISA Kit 大鼠組織蛋白酶K 96T

alpha Internexin 英文名稱： α-中連蛋白抗體 0.1ml

ADAMTS8 英文名稱： 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體 0.2ml

Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽 1-40 C端抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HP1 gamma 異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體 規(guī)格 0.2ml

TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2 96T

PKC alpha 英文名稱： 蛋白激酶C α抗體 0.2ml

COUP-TF1 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體 0.2ml

Anti-Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人細胞質(zhì)組氨酰(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒，英文名：TNNI2 ELISA KiISA Kit for Human UDP-glucuronosyltransferase 1-1大鼠蛋白信號調(diào)節(jié)因子6(RGS6)ELISA試劑盒，英文名：RGS6 ELISA Kit人Wnt-10a蛋白(WNT10A)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素34(IL34)ELISA試劑盒，英文名：IL34 ELISA Kit大鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒，英文名：SELE ELISA Kit豚鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒，英文名：SCF/MGF ELISA Kit血管緊張素(1-7)(Angiotensin (1-7))ELISA試劑盒通用96T0.156-10 ng/mL小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)ELISA試劑盒，英文名：HDAC1 ELISA KiISA Kit for Human Vasopressin V1b receptor小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)ELISA試劑盒，英文名：KLH ELISA Kit

ELISA Kit for Human Glycosylated hemoglobin A1c小鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒，英文名：DIO3 ELISA Kit人骨骼肌肌動蛋白α1(ACTα1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 umol/mL小鼠脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒，英文名：DPD ELISA KiISA Kit for Human Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]小鼠去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒，英文名：NE ELISA Kit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒，英文名：CC16 ELISA KiISA Kit for Human Calponin-2小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒，英文名：MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit人鈣蛋白酶6(Calpain-6)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒，英文名：SP-B ELISA KiISA Kit for Human C-C motif chemokine 17小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒，英文名：IL-9 ELISA Kit
小鼠血清封閉液 10ml Gibco原料,2%血清

VEGF-D 英文名稱： 血管內(nèi)皮生長因子D型抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體 規(guī)格 0.1ml

Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67) Ki-67 AntigenMulti-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DNA polymerase eta 英文名稱： DNA聚合酶η抗體 0.2ml

Anti-phospho-Afadin(Ser1718) 磷酸化絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1培養(yǎng)MN(Human Mannose) ELISA Kit 人甘露糖Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr1018) 磷酸化血小板源性生長因子受體-α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HMG14/HMGN1 高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 規(guī)格 0.1ml

16- Alpha OHE-1(Mouse 16- AlphaHydroxyestrogen 1)ELISA Kit Hpt/HP小鼠16α羥基雌酮1 96T

PCB 英文名稱： 酸羧化酶抗體 0.2ml

C1orf172 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框172抗體 0.2ml

Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr1018) 磷酸化血小板源性生長因子受體-α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。