詳細(xì)介紹
人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1價(jià)格
形態(tài)特性 圓形;多角
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 取材自引產(chǎn)的15周胚胎,中國(guó)醫(yī)學(xué)*基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:
3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P11
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1價(jià)格貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1價(jià)格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 人載脂蛋白A1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) 磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GRO Alpha/GRO-1/CXCL1 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因-1抗體GROa GROβ 規(guī)格 0.1ml
TIMP-3(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 96T
1-Oct 英文名稱: 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白1抗體 0.1ml
phospho-B Raf (Thr446 + Ser601) 英文名稱: 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) 磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
abc031 abc031Multi-class antibodies規(guī)格:
Rhesus antibody Rh Frizzled 2 Wnt信號(hào)受體FZD2蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Pentosidine ELISA Kit 大鼠戊糖素 96T
NFkB p105 / p50 英文名稱: 細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
AHSP 英文名稱: α紅細(xì)胞分化相關(guān)因子抗體 0.2ml
abc031 abc031Multi-class antibodies規(guī)格:
豚鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒,英文名:IL-17 ELISA KiISA Kit for Dopamine小鼠B細(xì)胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)ELISA試劑盒,英文名:BAFF/CD257/TNFSF13B ELISA KiISA Kit for Estrone小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒,英文名:VEGFR3 ELISA KiISA Kit for Human Fatty acid-binding protein, liver小鼠生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)ELISA試劑盒,英文名:GDF1 ELISA KiISA Kit for Human Glutathione peroxidase 3小鼠卵白蛋白(OVA)ELISA試劑盒,英文名:OVA ELISA KiISA Kit for Heparan sulfate小鼠胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA試劑盒,英文名:CASP7 ELISA Kit人軸突生長(zhǎng)誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒,英文名:ASMA ELISA Kit
人血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白金屬蛋白酶18(ADAM-TS 18)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒,英文名:TXB2 ELISA KiISA Kit for Human Nociceptin receptor大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒,英文名:ACV-A ELISA Kit人前列腺蛋白(Prostasin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL.大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒,英文名:CaN ELISA KiISA Kit for Human Prolactin-inducible protein大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒,英文名:hs-CRP ELISA Kit人黑色素濃激素(PMCH)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA試劑盒,英文名:βOHB ELISA KiISA Kit for Human Prostaglandin-H2 D-isomerase大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)ELISA試劑盒,英文名:Col Ⅵ ELISA Kit人核糖核酸酶抑制因子(Ribonuclease inhibitor)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠周期素依賴性激酶2(CDK2)ELISA試劑盒,英文名:CDK2 ELISA Kit
中性樹膠 100ml 進(jìn)口原料
Phospho-Wee1(Ser53) 英文名稱: 磷酸化WEE1蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser323) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-7Ra/CD127 peptide 白細(xì)胞介素-7受體a抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DYX1C1 英文名稱: DYX1C1蛋白抗體 0.2ml
Anti-AEG-1 AEG-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1價(jià)格Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) ELISA Kit 小鼠膠原酶IIMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGFR5/CLEC14A 表皮生長(zhǎng)因子受體5抗體 規(guī)格 0.2ml
(LDH)ELISA Kit 大鼠乳酸脫氫酶 96T
MST1 英文名稱: 蛋白激酶MST抗體 0.2ml
ASIC1/BNaC2/ASIC1A 英文名稱: 酸敏感離子通道1抗體 0.1ml
Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml