詳細(xì)介紹
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:11,12,13,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18,19;D19S433:17,18;D21S11:27,28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,10;D7S820:11;D8S1179:12,15;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,18,19,20;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA價格貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
DHT ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AD7C/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fbxw7/CDC4 Fbxw7蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TNFsR- II (Human Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 人壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T
4-Mar 英文名稱: 膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體 0.2ml
ABCB9 英文名稱: 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體 0.2ml
Anti-AD7C/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠c-jun ELISA Kit 大鼠c-jun ELISA KitMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Syntaxin 1 突觸融合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/Bio 生物素標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
PPAR- Gamma ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ 96T
NAV2 英文名稱: 維誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤蛋白1抗體 0.2ml
BTBD3 英文名稱: BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 0.2ml
Anti-Syntaxin 1 突觸融合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員7(TRPM7)ELISA試劑盒,英文名:TRPM7 ELISA KiISA Kit for Human Integrator complex subunit 3小鼠Klotho蛋白(KL)ELISA試劑盒,英文名:KL ELISA KiISA Kit for Lipoxin B4大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒,英文名:TNF-β ELISA KiISA Kit for Human Gastric triacylglycerol lipase大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒,英文名:ACEⅡ ELISA KiISA Kit for Human Mucosal addressin cell adhesion molecule 1大鼠腎腫瘤抗原(RAGE)ELISA試劑盒,英文名:RAGE ELISA KiISA Kit for Human Nuclear receptor subfamily 2 group C member 2大鼠磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒,英文名:pACCase ELISA KiISA Kit for Human Omega-3 fatty acid receptor 1大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒,英文名:Tn-Ⅰ ELISA Kit
人開關(guān)相關(guān)蛋白70(SWAP70)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)ELISA試劑盒,英文名:EMMPRIN ELISA KiISA Kit for Human Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit大鼠抵抗素樣α(Retnla)ELISA試劑盒,英文名:Retnla ELISA KiISA Kit for Human Proteasome subunit beta type-9大鼠γ干擾素(IFNγ)ELISA試劑盒,英文名:IFNγ ELISA KiISA Kit for Human Ribosome-binding protein 1大鼠11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)ELISA試劑盒,英文名:11β-HSD1 ELISA KiISA Kit for Human Equilibrative nucleoside transporter 1大鼠血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒,英文名:ANGPTL4 ELISA KiISA Kit for Human Suppressor of cytokine signaling 1大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)ELISA試劑盒,英文名:NT3 ELISA KiISA Kit for Human Alpha-tocopherol transfer protein大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒,英文名:MIP1β ELISA Kit
優(yōu)等胎血清 100ml 四季青
ZNF195 英文名稱: 鋅指蛋白195抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1026) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
FABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DHHC-20 英文名稱: 鋅指結(jié)構(gòu)蛋白酶20抗體 0.2ml
一種抑癌基因抗體 Anti-BECN1 0.1ml
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA價格HBsAg(Mouse hepatitis B virus surface antigen) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎表面抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EIG121 雌激素誘導(dǎo)基因121蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
(NF-KapB)ELISA Kit 大鼠核因子κB 96T
Mitoferrin 1 英文名稱: 線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.2ml
ARL11 英文名稱: ADP核糖基化因子樣11抗體 0.2ml
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml