詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 母系人肺巨細(xì)胞癌PG,單細(xì)胞克隆法分離鑒定得到的高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;裸鼠體內(nèi)成瘤率*,肺轉(zhuǎn)移率88%,淋巴轉(zhuǎn)移率94%。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
6傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-USF-1/FITC 熒光素標(biāo)記上游刺激因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子(趨化因子) Anti-CCL5/RANTES 0.1ml
SAP97 英文名稱: 突觸相關(guān)蛋白97抗體 0.2ml
E.coli 英文名稱: 腸致病性大腸桿菌抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1(Thr146) 磷酸化組蛋白H1抗體 規(guī)格 0.1ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧還蛋白還原酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CBL2 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Egr1 早期生長應(yīng)答蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
CR2/sCD21(Human Soluble Cluster of differentiation 21) ELISA Kit 人可溶性CD21 96T
Phospho-MYL(Ser19) 英文名稱: 磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體 0.1ml
AF10 英文名稱: 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體 0.1ml
Anti-CBL2 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人2,5寡腺苷酸合成酶3(OAS3)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒,英文名:IKBα ELISA KiISA Kit for Human Heparin cofactor 2大鼠錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)ELISA試劑盒,英文名:ANKRD1 ELISA Kit人腫瘤壞死因子受體超家族成員12A(TNFRSF12A)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠肌球蛋白重鏈2(MYH2)ELISA試劑盒,英文名:MYH2 ELISA KiISA Kit for Human Transforming growth factor beta-3大鼠封閉蛋白3(CLDN3)ELISA試劑盒,英文名:CLDN3 ELISA Kit維生素A(Vitamin A)ELISA試劑盒通用96T0.156-10 ng/mL大鼠腸堿性磷酸酶(ALPI)ELISA試劑盒,英文名:ALPI ELISA Kit大鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒,英文名:αHSG ELISA Kit大鼠5-羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒,英文名:5-HT ELISA Kit
人磷脂酰肌醇-5-磷酸鹽4-激酶2γ型(PIP4K2C)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒,英文名:PRL ELISA Kit豚鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒,英文名:IL5 ELISA KiISA Kit for Human AP-1 complex subunit mu-1小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒,英文名:PROGR ELISA Kit人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白9(ADAMTS9) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒,英文名:AR ELISA KiISA Kit for Human Arginase-1小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒,英文名:Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit人雙調(diào)蛋白(AREG)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒,英文名:ET-1 ELISA KiISA Kit for N(6)-Carboxymethyllysine小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒,英文名:MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit
雞血清蛋白干粉 10mg/50mg 國產(chǎn)
WAPL 英文名稱: EBV核蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr198) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 規(guī)格 0.1ml
IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
phospho-DDX58 (Ser8) 英文名稱: 磷酸化DDX58抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1培養(yǎng)Bid(Human BH3 interacting domain death agonist) ELISA Kit 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MEF2A 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 規(guī)格 0.1ml
AChE(Human Acetylcholinesterase) ELISA Kit 人乙酰膽堿酯酶 96T
RAIDD 英文名稱: CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
C1orf177 英文名稱: 1號(hào)染色體開放閱讀框177抗體 0.2ml
Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml