詳細(xì)介紹
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | YS-01S6614 |
商品介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定意義
CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個(gè)中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。
配合測(cè)定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進(jìn)行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進(jìn)行狀況。
測(cè)定原理:
CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進(jìn)一步與苯肼反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長(zhǎng)下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
粗酶液提取:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測(cè)。
2. 細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 血液可直接測(cè)定,或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。
大鼠以紅藻氨酸為激動(dòng)劑的離子型谷氨酸受體2(GRIK2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒異硫霉素鏈霉GLI1 (C68H3) Rabbit mAb
大鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 哈氏木霉Rab11 Antibody
大鼠谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶α1(GSTA1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒新月彎孢Phospho-NPM (Thr199) Antibody
大鼠谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶O1(GSTO1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒新城疫病NPM Antibody
大鼠谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶θ1(GST T1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒馬克斯克魯維酵母保加利亞變種Bit1 Antibody
大鼠谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶θ2(GST T2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒異常威克漢姆酵母SLP-76 (D1R1A) Rabbit mAb (PE Conjugate)
大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒地衣芽孢桿FABP4 (D25B3) XP® Rabbit mAb
大鼠腦糖原磷酸化酶(PYGB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒栗疫病FABP4 (D25B3) XP® Rabbit mAb
大鼠肌肉糖原磷酸化酶(PYGM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黃赭色鏈霉Nod1 Antibody
大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3a)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒草假單胞CD8α (2.43) Rat mAb (FITC Conjugate)
大鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒啤酒酵母Arf6 Antibody
大鼠血小板糖蛋白V(GP5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒植物乳桿Rab5 (C8B1) Rabbit mAb
大鼠促性腺釋放受體(GnRHR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒杏鮑菇Rab5 (C8B1) Rabbit mAb
大鼠促性腺釋放(GnRH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母Phospho-GSK-3β (Thr390) Antibody
大鼠顆粒體蛋白(GRN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒哈茨木霉PP2C-α (D18C10) XP® Rabbit mAb
線粒體檸檬酸(MCA)微量法鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human ITGA1/CD49a(Integrin alpha-1) ELISA Kit小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒,
阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體Human NKp44/NCR2(Natural cytotoxicity triggering receptor 2) ELISA Kit小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒,
老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS1抗體Human NKp46/NCR1(Natural cytotoxicity triggering receptor 1) ELISA Kit大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒,
凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體Human Cavin 1(Polymerase I and transcript release factor) ELISA Kit大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒,
豬圓環(huán)病Ⅱ型衣殼蛋白抗體Human NKp30/NCR3(Natural cytotoxicity triggering receptor 3) ELISA Kit豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒,
血管加壓素激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體Human INT8(IntegRator complex subunit 8) ELISA Kit豬磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒,
干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原抗體Human CAMP(Cathelicidin Antimicrobial Peptide) ELISA Kit組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
氯離子通道蛋白6抗體Human INT6(IntegRator complex subunit 6) ELISA Kit胃抑素(GIP)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
測(cè)定步驟:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對(duì)照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
6. 測(cè)定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。