詳細(xì)介紹
基本信息:
產(chǎn)品名稱:淀粉磷酸化酶(SP)紫外分光光度法
測(cè)試方法:紫外分光光度法
規(guī)格 : 50管/48樣
貨號(hào):YS-01S6754
測(cè)定意義
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程一的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負(fù)責(zé)延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。
在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個(gè)數(shù)量級(jí),一般認(rèn)為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測(cè)定意義。
測(cè)定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
豬核受體相互作用蛋白1(NRIP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒新疆鹽地桿β-Actin (13E5) Rabbit mAb
豬c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 短桿狀馬賽β-Actin (13E5) Rabbit mAb
豬β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 博斯氏屬β-Actin (13E5) Rabbit mAb
豬白分化抗原CD109(CD109)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 戊糖片球SUMO-2/3 (18H8) Rabbit mAb
豬周期素依賴性激酶2(CDK2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 短小芽胞桿SUMO-2/3 (18H8) Rabbit mAb
豬多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽孢桿SnoN Antibody
豬和肽素(CPP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 勒仔樹根瘤AID (L7E7) Mouse mAb
豬抗凝血酶(AT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 微桿屬DNMT3A (E9P2F) Rabbit mAb
豬α甘露糖苷酶(α Manase)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 米曲霉Puma Antibody
豬肌營養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 ChryseobacteriumPuma Antibody
豬突觸足蛋白(SYNPO)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒油菜假單胞WNK1 Antibody
豬果糖二磷酸縮酶C(ALDOC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 產(chǎn)朊假絲酵母Csk (C74C1) Rabbit mAb
豬表皮調(diào)節(jié)素(EREG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑曲霉Csk (C74C1) Rabbit mAb
豬胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒弗蘭克氏Phospho-p63 (Ser160/162) Antibody
豬8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 灰葡萄孢(灰霉?。〨host Dye™ Violet 450 Viability Dye
淀粉磷酸化酶(SP)紫外分光光度法CD3抗體Human MT-CO1(Cytochrome c oxidase subunit 1) ELISA Kit亞氨基二乙酸
CP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體Human LAMB1(Laminin subunit beta-1) ELISA Kit冬綠苷 Gaultherin
電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體Human FBN2(Fibrillin-2) ELISA Kit環(huán)黃芪醇 cycloastragenol
煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體Human TGFBR1(TGF-beta receptor type-1) ELISA Kit蘋果酸脫氫酶
C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體Human PRKCE(Protein kinase C epsilon type) ELISA Kit金
γ干擾素誘導(dǎo)單核因子抗體Human PRKCG(Protein kinase C gamma type) ELISA Kit鉑片
血小板因子4抗體Human NRGN(Neurogranin) ELISA Kit人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒, IL-2 ELISA kit
血小板趨化因子7蛋白抗體Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA Kit人抗乙型肝炎病表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒, HBsAb ELISA