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谷氨酰胺合成酶(GS)微量法

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更新時(shí)間:2022-03-08 16:53:53瀏覽次數(shù):219

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣
貨號(hào) YS-01S6514 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供于科研使用    
谷氨酰胺合成酶(GS)微量法公司正在熱銷的產(chǎn)品:GOD人葡萄糖氧化酶ELISA檢測(cè)試劑盒
GKRP人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒
GCK人葡萄糖激酶ELISA檢測(cè)試劑盒
GPI人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶ELISA檢測(cè)試劑盒
G6PD人葡萄糖6磷酸脫氫酶ELISA檢測(cè)試劑盒

詳細(xì)介紹

圖片1.png

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

谷氨酰胺合成酶(GS)微量法

100管/48樣

微量法

YS-01S6514

商品介紹:

公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定意義
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過(guò)多的銨離子對(duì)生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。

測(cè)定原理

GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在540nm處有最大吸收峰,可用分光光度計(jì)測(cè)定。

所需的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測(cè)。

2. 細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血液可直接測(cè)定,或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。

測(cè)定步驟:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。

3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 對(duì)照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

6. 測(cè)定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

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