詳細介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:生長抑素受體5ELISA檢測試劑盒
英文名稱:somatostatin receptor 5
檢測范圍:12.5pg/mL~400pg/mL
貨號:YS-E98896
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學研究。
樣品形式:血清血漿細胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術服務要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴。
ADAM17 ProteinRat重組大鼠 ADAM17 蛋白 (His 標簽)
O/F培養(yǎng)基(HLGB)250g用于鑒別弧菌葡萄糖代謝類型(發(fā)酵型或氧化型)(SN標準)
CD302 ProteinRat重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白 (His 標簽)
HA ProteinH7N7重組甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
IL18R1 ProteinCanine重組狗 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽)
吡喹酮 英文名稱:Praziquantel 規(guī)格:100mg 保存:-20℃,避光
ACP1 ProteinHuman重組人 ACP1 / LMW-PTP 蛋白 (GST 標簽)
FST ProteinMouse重組小鼠 Follistatin / FST (FS288) 蛋白 (Fc 標簽)
JAM2 ProteinMouse重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
芹糖甘草苷 英文名稱:Liquiritin apioside 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,避光
SGK3 ProteinHuman重組人 SGK3 / SGKL 蛋白 (His & GST 標簽)
王不留行黃酮苷 ※ 英文名稱:Semen Vaccariae Huang Tonggan * 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,避光
RVS肉湯250g用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)
IL20 ProteinHuman重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白
生長抑素受體5ELISA檢測試劑盒 Adiponectin Receptor 1脂肪組織分化相關蛋白抗體 CENP-B ELISA Kit 著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒
ADM R脂聯(lián)素受體1抗體 LATS ELISA Kit 長效甲狀腺刺(LATS)ELISA試劑盒
Adiponectin腎上腺髓質(zhì)素受體抗體 TNS4 ELISA Kit 張力蛋白4(TNS4)ELISA試劑盒
ADM脂聯(lián)素抗體 MEC/CCL28 ELISA Kit 粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒
Adenosine A3 Receptor腎上腺髓質(zhì)素抗體 MUC3 ELISA Kit 粘蛋白3(MUC3)ELISA試劑盒
ADRA2腺苷受體A3抗體 MUC2 ELISA Kit 粘蛋白2(MUC2)ELISA試劑盒
ADRB1ADRA2腎上腺素能受體2抗體 MUC7 ELISA Kit 粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒
ADRB2腎上腺素能受體β1抗體 MUC5B ELISA Kit 粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒
AGEs腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體 MUC5AC ELISA Kit 粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒
Aggrecan1晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體 APRIL ELISA Kit 增殖誘導配體(APRIL)ELISA試劑盒
ALAS-E軟骨蛋白聚糖抗體 EGR1 ELISA Kit 早期生長反應因子1(EGR1)ELISA試劑盒
ASPP15-氨基乙酰丙酸合酶1抗體 EPCA2 ELISA Kit 早期前列腺癌抗原2(EPCA2)ELISA試劑盒
ASPP2p53凋亡刺激蛋白1抗體 CD69 ELISA Kit 早期活化抗原CD69(CD69)ELISA試劑盒
ARIP2BP53凋亡刺激蛋白2抗體 PS-2 ELISA Kit 早老素2(PS-2)ELISA試劑盒
AIMP2素受體2B抗體 PS-1 ELISA Kit 早老素1(PS-1)ELISA試劑盒