詳細(xì)介紹
硝酸纖維素薄膜產(chǎn)品概述:
硝酸纖維素薄膜
英文名稱:NC;Nitroate cellulose sheets
其他名稱:硝酸纖維素膜
規(guī)格:30×3cm/卷
性狀(以下信息僅供參考):硝纖膜比較脆,又容易卷,操作要小心,不適合用于需要多次重復(fù)清洗的用途。選擇硝纖膜時(shí)要注意的是選擇合適的孔徑,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔徑的膜,小于20KD的話建議選擇0.2um的,如果小于7KD的話選擇0.1um的膜。另外還要注意選擇純的NC膜——混有含醋酸纖維(CM)的NC膜結(jié)合力會(huì)有所降低。由于NC膜上結(jié)合的蛋白會(huì)因?yàn)橐恍┤ノ蹌┒淮?,因此在封閉時(shí)使用較溫和的Tween20,而且濃度不要超過(guò)0.3%
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)硝酸纖維素膜是蛋白印跡廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì),對(duì)蛋白有很強(qiáng)的結(jié)合能力,而且適用于各種顯色方法,包括同位素,化學(xué)發(fā)光(Luminol類)、常規(guī)顯色、染色和熒光顯色;背景低,信噪比高。NC膜的使用也很簡(jiǎn)便,比如不需要甲醛預(yù)處理,只要在無(wú)離子水面浸潤(rùn)排出膜內(nèi)氣泡,再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了;比如NC膜很容易封閉,也不需要特別嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那逑礂l件。轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以穩(wěn)定保存很長(zhǎng)時(shí)間
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公司優(yōu)勢(shì):
我司為專業(yè)的生物試劑公司,不僅代理各種知名的國(guó)際國(guó)內(nèi)品牌,還注重自身的和,具備一定的專業(yè)背景和實(shí)力基礎(chǔ)。我司成立較早,在殘酷的競(jìng)爭(zhēng)環(huán)境中屹立至今,這與我們誠(chéng)信至上以及注重專業(yè)實(shí)力的信念是離不開(kāi)的。經(jīng)過(guò)多年的摸爬滾打,我司擁有屬于自己的營(yíng)銷理念和方法。我司定位明確,客戶精準(zhǔn),眼光高遠(yuǎn),立足于當(dāng)下前沿性的科研領(lǐng)域,提供當(dāng)前科研所需的試劑以及耗材產(chǎn)品,客戶遍布各大高校、科研院所以及其他性的企業(yè)。關(guān)于硝酸纖維素薄膜訂購(gòu)事宜以及合作詳情可點(diǎn)擊這里咨詢我們。
Western Blot操作方法:
1.培養(yǎng)細(xì)胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
1)在合適的鹽濃度下,應(yīng)保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復(fù)性。
2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物和共價(jià)鍵二硫鍵,使其形成一個(gè)各自多肽的溶液。
3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過(guò)程中的人為的修飾,制備過(guò)程應(yīng)在低溫下進(jìn)行,以避免細(xì)胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,但要注意不要反復(fù)凍融。
2.組織樣品的制備:
手術(shù)切除的組織塊迅速置于預(yù)冷的0.95生理鹽水中,漂洗數(shù)次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個(gè)較小的組織塊放入機(jī)戒組織勻漿器中,按組織凈重,裂解液=1:10的比例,加入相應(yīng)體積的裂解液進(jìn)行勻漿,離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理,具體方法見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)的樣品制備,也可以冷凍干燥降解核酸后,將凍干的蛋白質(zhì)樣品溶解在適當(dāng)?shù)纳蠘?buffer中,混勻后靜置3小時(shí)使樣品中的蛋白質(zhì)充分的溶解,有5分鐘即可,4度離心收集。)加入Laemmli樣品緩沖液(視蛋白樣品濃度,以1:1或1:2的比例混合)強(qiáng)力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準(zhǔn)備就緒(樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存,-20℃存放的樣品可穩(wěn)定保持?jǐn)?shù)月。)
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