詳細(xì)介紹
司班20CAS號(hào):1338-39-2產(chǎn)品概述:
司班20
英文名稱:Span 20
其他名稱:司班20
CAS號(hào):1338-39-2
C18H34O6=346.46
級(jí)別:CP
羥值:330~360KOHmg/g
酸值:≤7KOHmg/g
皂化值:160~175KOHmg/g
重金屬:≤0.001%
灼燒殘?jiān)?:≤0.5%
性狀(以下信息僅供參考):琥珀油狀或褐色粘稠液體,溶于礦物油、棉籽油、甲醇、醚醇、異丙醇和醚二醇,不溶于水和丙二醇。相對(duì)密度 (d204)1.032。熔點(diǎn)14~16℃。折光率(n20D) 1.4740。親水親油值(HLB) 8.6。黏度約4500mPa·s(25℃)。閃點(diǎn)>110℃
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)非離子型表面活性劑,乳化劑、潤滑劑、干燥劑、氣相色譜固定液,分離分析含氧化合物
保存:RT
公司優(yōu)勢(shì):
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Western Blot操作方法:
1.培養(yǎng)細(xì)胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
1)在合適的鹽濃度下,應(yīng)保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復(fù)性。
2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物和共價(jià)鍵二硫鍵,使其形成一個(gè)各自多肽的溶液。
3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應(yīng)在低溫下進(jìn)行,以避免細(xì)胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,但要注意不要反復(fù)凍融。
2.組織樣品的制備:
手術(shù)切除的組織塊迅速置于預(yù)冷的0.95生理鹽水中,漂洗數(shù)次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個(gè)較小的組織塊放入機(jī)戒組織勻漿器中,按組織凈重,裂解液=1:10的比例,加入相應(yīng)體積的裂解液進(jìn)行勻漿,離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理,具體方法見細(xì)胞培養(yǎng)的樣品制備,也可以冷凍干燥降解核酸后,將凍干的蛋白質(zhì)樣品溶解在適當(dāng)?shù)纳蠘?buffer中,混勻后靜置3小時(shí)使樣品中的蛋白質(zhì)充分的溶解,有5分鐘即可,4度離心收集。)加入Laemmli樣品緩沖液(視蛋白樣品濃度,以1:1或1:2的比例混合)強(qiáng)力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準(zhǔn)備就緒(樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存,-20℃存放的樣品可穩(wěn)定保持?jǐn)?shù)月。)
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