詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.1PCR管 | YS-01P6399 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
瑞氏色 BS2,4-二硝標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:甲小鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒
瑞氏色 高純級,>97%(HPLC),用于血液和生物學(xué)染色2,5-二硝標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mg/ml,溶劑:甲小鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒
二甲酚橙 AR2,4-二硝 GR,98%小鼠α1抗胰糜蛋白(AACT)免疫試劑盒
二甲酚橙 高純級2,4-二硝 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析小鼠α1干擾(IFN-α1)免疫試劑盒
4-二乙氨基甲 98%2,4-二硝 99%小鼠Wnt-3a蛋白(WNT3A)免疫試劑盒
鄰 99%硝胍 CP,98%小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)免疫試劑盒
對 CP,98%硝胍 >99.0%(GC)小鼠V-Ha-Ras肉瘤病癌基因同源物(HRAS)免疫試劑盒
硒粉 99.9% metals basis,200目反式-1,3-二烯 97%小鼠T活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒
二異丁基氫化鋁 1.0 M in hexanes羥基乙叉二膦 60%水溶液小鼠T表面糖蛋白CD3 epsilon鏈(CD3E/T3E)免疫試劑盒
基鋁 2.0 M 甲溶液聚烯 平均分子量M.W ~3,000 小鼠T白血病同源盒蛋白1(Tlx1/Hox11/Tlx-1)免疫試劑盒
二 97%聚烯鈉 50% 水溶液小鼠Toll樣受體7(TLR7)免疫試劑盒
2-乙鹽鹽 98%異丁酐 98%小鼠Toll樣受體5(TLR-5)免疫試劑盒
甲氧基鹽鹽 98%四鄰二甲酐 98%小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)免疫試劑盒
甜菜,無水 98%乙酰溴 97%小鼠Tau蛋白免疫試劑盒
甜菜,一水 99%溴代炔 99%小鼠Smad7 免疫試劑盒
馬、驢源性核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒,芐基溴化鎂促腎上腺皮質(zhì)激(1-39)抗體
人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒,6-芐氧基吲哚促腎上腺皮質(zhì)激ACTH(18-39)抗體
小鼠丙酮激M2型同工(M2-PK)ELISA試劑盒,3-羥基磺(含有數(shù)量不等的3,3'-氧基二烷磺)(約的水溶液,約7.8mol/L)促腎上腺皮質(zhì)激ACTH (7-23)抗體
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒,正基三基溴化磷活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒,正基三基溴化磷α1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒,4-聯(lián)α1性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)
大鼠表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒,4-聯(lián)磷化水通道蛋白2抗體
大鼠鈣調(diào)磷(CaN)ELISA試劑盒,4-聯(lián)酪氨轉(zhuǎn)氨抗體
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。