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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：水生動(dòng)物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒48T
貨號(hào):YS-01P6714
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。
O-叔丁基-D-酪氨 98.5%乳果糖 99%大鼠縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)免疫試劑盒
O-芐基-L-酪氨芐酯鹽鹽 98.5%溶菌，雞蛋白 40000U/mg大鼠封閉蛋白4(CLDN4)免疫試劑盒
O-芐基-L-酪氨甲酯鹽鹽 98.5%D(-)-來(lái)蘇糖 99.0% 大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒
L-4-溴氨 98%L-來(lái)蘇糖 99%大鼠分泌型磷脂A2(sPLA2)免疫試劑盒
D-4-溴氨 98%L-(-)-半乳糖 99%大鼠肺炎支原體(MP)抗體免疫試劑盒
Boc-3-(1-萘基)-D-氨 98%L-(-)-葡萄糖 98%大鼠肺炎病抗體(PV-Ab)免疫試劑盒
Boc-L-3-(1-萘基)-氨 99%D-甘露糖 99%大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)免疫試劑盒
Boc-3-(2-萘基)-D-氨 99%D-甘露糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
Boc-3-(2-萘基)-L-氨 99%D(+)-密二糖，一水 99%大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
BOC-L-3-(3-吡啶基)-氨 99%D(+)-密二糖，一水 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒
Boc-L-β-高氨 98%甲基-а-D-吡喃半乳糖 98%大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)免疫試劑盒
Boc-L-β-高精氨對(duì)甲磺鹽 98%3-甲基-2-并噻唑酮腙鹽鹽，水合 98%大鼠肥胖抑制免疫試劑盒
Boc-L-beta-谷氨 5-芐酯 98%麥芽三糖 96%大鼠肥大類胰凝乳蛋白免疫試劑盒
Boc-L-beta-高谷氨 6-芐酯 98%麥芽三糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠肥大類胰蛋白(MCT)免疫試劑盒
Boc-L-beta-高異亮氨 98%D(+)松三糖，一水 99%大鼠防御5 免疫試劑盒
水生動(dòng)物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒48T賴 氨脫羧肉湯2,6-二甲氧基周期依賴性激10
L-天門冬氨鉀3-肼鹽鹽8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體
BOC-L-脯氨3-肼鹽鹽磷化分裂周期蛋白25B抗體
L-甲狀腺3-肼鹽鹽磷化分裂周期蛋白25B抗體
二氫楊梅 DihydromyricetinLapab磷化半胱蛋白蛋白6抗體
T4 DNA聚合N-基-4-哌啶酮9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框172抗體
多粘菌E硫鹽N-基-4-哌啶酮磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑
β-谷甾醇1-(3-芐基)哌表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 序列資源豐富，除公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
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