詳細介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細參考數值:
產品名稱:乳腺癌易感蛋白ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Breast Cancer Susceptibility Protein
檢測范圍:31.25pg/mL~1000pg/mL
貨號:YS-E98930
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學研究。
樣品形式:血清血漿細胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質期:6個月,本公司試劑盒系列產品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術服務要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴。
TNFRSF17 ProteinHuman重組人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 蛋白 (His & Fc 標簽)
HA ProteinH7N9重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
黃楊堿 英文名稱:Huang Yangjian 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,避光
川芎 英文名稱:Ligusticum chuanxiong Hort 規(guī)格:1g 保存:-20℃,避光
IL1R2 ProteinMouse重組小鼠 IL1R2 / CD121b 蛋白 (His 標簽)
甲基原薯蕷皂苷 英文名稱:Methyl protodioscin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,避光
營養(yǎng)瓊脂(瓊脂20g)250g用途:用于樣品中菌落總數的計數。
IL1R1 ProteinCynomolgus重組食蟹猴 IL1R1 蛋白 (His 標簽)
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)250g用于產氣莢膜梭菌確證試驗的細菌培養(yǎng)
MERTK ProteinHuman重組人 MERTK / Mer 蛋白 GST 標簽
IL1B ProteinCanine重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白
甘松 英文名稱:Gan Song 規(guī)格:2.4g 保存:-20℃,避光
CDCP1 ProteinHuman重組人 CDCP1 / CD318 蛋白 (Fc 標簽)
ICAM2 ProteinMouse重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白
乳腺癌易感蛋白ELISA檢測試劑盒 Aurora Bβ淀粉樣肽(1-28)抗體 glycolipid ELISA Kit 糖脂抗體 (glycolipid)ELISA試劑盒
Aggrecanase-2有絲分裂激酶B抗體 GP-MM ELISA Kit 糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒
ADAM10軟骨蛋白聚糖抗體 GP-II ELISA Kit 糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒
ASB9去整合素樣金屬蛋白酶10抗體 GP-BB ELISA Kit 糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒
ASB8含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體 GP ELISA Kit 糖原磷酸化酶(GP)ELISA試劑盒
ABP1含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族8抗體 GSK-3 ELISA Kit 糖原合成酶激酶3(GSK-3)ELISA試劑盒
ACTR1A植物生長ABP1抗體 GSK ELISA Kit 糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒
AHSP肌動蛋白相關蛋白1抗體 CDT ELISA Kit 糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒
ATP1α紅分化相關因子抗體 GR-β ELISA Kit 糖皮質受體β(GR-β)ELISA試劑盒
AFM血管緊張素蛋白1抗體 GR-α ELISA Kit 糖皮質受體α(GR-α)ELISA試劑盒
AFAP1L2Alpha清蛋白抗體 GPI ELISA Kit 糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA試劑盒
AHNAKAFAP1L2抗體 CA19-9 ELISA Kit 糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒
AJAP1神經分化相關蛋白AHNAK抗體 CA72-4 ELISA Kit 糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒
ADAM13粘合連接相關蛋白1抗體 CA50 ELISA Kit 糖類抗原50(CA50)ELISA試劑盒
Agrin去整合素樣金屬蛋白酶13抗體 CA19-9 ELISA Kit 糖類抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒