詳細(xì)介紹
基本信息:
產(chǎn)品名稱:NADP蘋果酸酶(NADPME)微量法
測(cè)試方法:微量法
規(guī)格 : 100管/96樣
貨號(hào):YS-01S6364
測(cè)定意義
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測(cè)定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測(cè)定原理:
NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
人鈣周期蛋白結(jié)合蛋白(CACYBP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母CXXC1 Antibody
人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 潮汐紅色桿Lamin B1 (D4Q4Z) Rabbit mAb
人巨噬清道夫受體1 (MSR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit
人鈣調(diào)素(CAM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 纖維黃鏈霉MITF (D5G7V) Rabbit mAb
人鈣聯(lián)蛋白(CNX)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 米川黃桿α-Parvin (D7F9) XP® Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjugate)
人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 鏈輪枝屬HSP27 Antibody Sampler Kit
人鈣視網(wǎng)膜蛋白(CR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒阪崎腸桿Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit
人鈣腔蛋白(CALU)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 嗜線蟲賽雷氏Cleaved Caspase-8 (Asp391) (18C8) Rabbit mAb (PE Conjugate)
人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-Ab)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蠟?zāi)貶EXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb
人粘蛋白17(MUC17)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒小海螺16% Formaldehyde
人粘蛋白2(MUC2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒栗疫病Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Blocking Peptide
人粘蛋白20(MUC20)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒肋生鹽弧肋生亞種DMSO (Dimethyl Sulfoxide)
人腦素受體(CNR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒教堂小短桿DMSO (Dimethyl Sulfoxide)
人腺苷酸環(huán)化酶相關(guān)蛋白1(CAP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 多產(chǎn)色鏈霉SignalSilence® Fatty Acid Synthase siRNA II
人糖抗原125(CA125)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 大腸埃希Vandetanib
NADP蘋果酸酶(NADPME)微量法自噬相關(guān)蛋白18抗體Human MARVELD3 ELISA Kit人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒,
自噬相關(guān)蛋白4A抗體Human MAS1L ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒,
載脂蛋白A4抗體Human MAST1 ELISA Kit兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒,
12脂氧合酶抗體Human MAST3 ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
血管緊張素III抗體Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
腺苷酸環(huán)化酶3抗體Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
血管動(dòng)蛋白抗體Human Caspase 12 ELISA Kit艾柯病IgM(ECHO IgM)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
腺病早期E1A蛋白抗體Human CD320 ELISA Kit糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人