詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6361 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
原甲酯 99.8%,無水級三吡咯烷基溴化鏻六磷鹽 98%小鼠性β葡萄糖(GBA)免疫試劑盒
鹽硫 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-溴-1,3,5-三異基苯 96.0 %小鼠絲裂原激活的蛋白激/MAP激(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)免疫試劑盒
2,3,5-三酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六磷酯 98% 小鼠絲氨轉(zhuǎn)肽抑制劑Kazal type 3(SPINK3)免疫試劑盒
1,1,1-三(羥甲基)乙烷 97%2-氯-1,3-二甲基咪唑鎓四鹽 98%小鼠水通道蛋白9(AQP-9)免疫試劑盒
三磺酰氯 99%6-氯-1-羥基苯并三氮唑 98%小鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒
十三 97%1-(氯-1-吡咯烷基亞甲基)吡咯烷六磷鹽 98%小鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒
四丁基氫氧 ~40% 水溶液,離子色譜級2-氯-1,3-二甲基氯化咪唑鎓 90%小鼠水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒
2,4,5-三氯 分析標(biāo)準(zhǔn)品氯代二哌啶碳鎓六磷鹽 98%小鼠水通道蛋白2(AQP-2)免疫試劑盒
甲基叔戊基 97%氯代三吡咯烷基鏻六磷鹽 98%小鼠水通道蛋白1(AQP-1)免疫試劑盒
DL-α-酚琥珀酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品多肽試劑TCTU 98%小鼠水通道蛋白0(AQP-0)免疫試劑盒
基氧鎓四鹽 96%2-氯-1,3-二甲基咪唑六磷鹽 98%小鼠雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒
(基硅烷基)重氮 2.0M 己烷溶液3-(二乙氧基磷酰氧基)-1,2,3-苯并三-4-酮 98% 小鼠瘦(LEP)免疫試劑盒
三(2-氨基乙基) 97%代磷二乙酯 純度 ≥90%小鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒
2-硫脲嘧啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-(2-吡啶酮-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四鹽 99%小鼠嗜性粒過氧化物(EPO)免疫試劑盒
四己基硫氫銨 用于離子色譜, ≥99.0% (T)N,N'-二環(huán)己基碳二亞 99.0%小鼠嗜粒趨化因子(ECF)免疫試劑盒
阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)ELISA試劑盒--動物,人6-溴-2-萘酚α2C-AR腎上腺能受體抗體
結(jié)晶紫增菌液 用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))6-溴-2-萘酚中心體蛋白AZI1抗體
L-精氨乙酯6-溴-2-萘酚α蛋白激3抗體(心肌)
2,4-二甲氧基十二羰基三釕表皮型脂氧合3抗體(魚鱗病相關(guān)蛋白)
小鼠磷脂酰絲氨(PS)ELISA試劑盒,十二羰基三釕錨蛋白重復(fù)域28抗體
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒,十二羰基三釕淋巴相關(guān)AF4樣蛋白抗體
大鼠白介8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒,硫鐵(III) 水合物錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體
誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)ELISA聯(lián)免疫吸附試劑盒--專賣硫鉻,水合錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體