詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6359 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
氯化亞錫 SP野黃芩 分析標(biāo)準(zhǔn)品小鼠同型半胱氨(Hcy)免疫試劑盒
氯化亞錫 ≥99.999% metals basis花旗松 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%小鼠鐵調(diào)(Hepc)免疫試劑盒
蔗糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品蔓荊子黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%(HPLC)小鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒
單硬脂甘油酯 99%(GC)二苯胍 97%小鼠天門冬氨氨基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
草鍶 5N,99.999%三聚硫 95%小鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒
四硫磺鈉,二水 98%偏硅鈉,五水 95%小鼠糖原磷化同工II(GP-II)免疫試劑盒
硫-5-羥色肌酐 98%零水偏硅鈉 SiO2, 44-47% 小鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
(-)-鹽東莨菪 ≥99.0% 偏硅鈉,九水 AR小鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
(-)-鹽東莨菪 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0% 鈦四丁酯 CP,98.0%小鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
糖精鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)小鼠糖皮質(zhì)類固受體(GR)免疫試劑盒
環(huán)草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品薯蕷皂 90%小鼠糖皮質(zhì)激受體β(GR-β)免疫試劑盒
2,4,5-涕 分析標(biāo)準(zhǔn)品橙皮 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥98%小鼠糖皮質(zhì)激受體α(GR-α)免疫試劑盒
乙鈉,無水 電泳級, ≥99%橙皮 97%小鼠糖類抗原199(CA199)免疫試劑盒
十二烷基硫鈉 分子生物學(xué)級,≥98.5% (GC)番茄紅 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%小鼠糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒
十二烷基硫鈉 離子對色譜級,≥99.0% (GC)胡椒 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% 小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管人乙呋酮(AD)ELIS人乙呋酮(AD)ELISA試劑盒, A試劑盒,水合高氯鐵α1微球蛋白抗體
人補體1q(C1q)ELISA試劑盒,水合高氯鐵α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體
大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒,埃博霉B腺A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體
倉鼠組織蛋白K(cath-K)ELISA試劑盒,2-氯-4-芐AMPK的相關(guān)蛋白激5抗體
兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒,2-氯-4-芐致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體
抑制(INH)ELISA試劑盒--動物,人2-氯-4-芐腺脫氨抗體
抗甲型肝炎病IgM抗體(anti-HAV)ELISA試劑盒--動物,人N,N'-二-BOC-1H-1-胍基吡唑(Pyrazol(Boc)2)含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體
煌綠黃嘧啶瓊脂N,N'-二-BOC-1H-1-胍基吡唑(Pyrazol(Boc)2)ATRNL1蛋白抗體
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。