詳細(xì)介紹
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6357 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
硫奎尼丁 USP級硫脲 AR,99%小鼠性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒
2-喹喔啉羧 97%硫脲 CP,98%小鼠硒蛋白M(SELM)免疫試劑盒
羅丹明B 高純級,≥95.0%(HPLC)硫脲 ACS, ≥99.0%小鼠戊型肝炎病(HEV)抗體(IgG)免疫試劑盒
樹脂天青 90%(R)-(+)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%小鼠戊糖(Pentosidine)免疫試劑盒
羅丹明6G AR(S)-(-)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%小鼠胃泌調(diào)節(jié)免疫試劑盒
樹脂天青 for cell culture,≥90% (HPLC)(±)-2,2'-雙-(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%小鼠胃泌(Gastrin)免疫試劑盒
芘 99%二苯基次膦酰氯 98%小鼠胃動(MTL)免疫試劑盒
迷迭香 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%對氯苯甲 AR,99.0%小鼠胃蛋白(PG)免疫試劑盒
分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%蘆薈大黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品小鼠維生K1(VK1)免疫試劑盒
D-核糖-5-磷二鈉鹽 95%蘆薈大黃 95%小鼠維生E(VE)免疫試劑盒
(R)-1-氨基-8-(二苯基膦)-1,2,3,4 -四氫 97%紅 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%小鼠維生D3(VD3)免疫試劑盒
海藻鈉 生化級,用于固定、等梓 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97% (HPLC)小鼠維生D2(VD2)免疫試劑盒
天狼星玫紅,BB AR梓 ≥97% (HPLC)小鼠維生D(VD)免疫試劑盒
亞磷鈉,五水 AR1-脫氧野尻霉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%小鼠維生C(VC)免疫試劑盒
7B 95%脫水穿心蓮內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%小鼠維生B6(VB6)免疫試劑盒
霍亂弧菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒,(R)-(+)-1-苯基乙自噬相關(guān)蛋白18抗體
兔子γ干擾(IFN-γ)ELISA試劑盒,(R)-(+)-1-苯基乙自噬相關(guān)蛋白4A抗體
間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒--動物,人(1R,2S,5R)-(-)-薄荷基 (S)-p-甲苯亞磺酯載脂蛋白A4抗體
多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒--動物,人3,5-二叔丁苯12脂氧合抗體
抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒--動物,人3,5-二叔丁苯血管緊張III抗體
艾柯病IgM(ECHO IgM)ELISA試劑盒--動物,人7,7,8,8-四基對苯二二腺環(huán)化3抗體
糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒--動物,人7,7,8,8-四基對苯二二血管動蛋白抗體
D/E中和瓊脂7,7,8,8-四基對苯二二腺病早期E1A蛋白抗體