詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作:?
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測試劑盒說明書 | Stachybotrys spp.PCR | PCR檢測試劑盒 |
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
Phospho-YAP1(Ser127)英文名稱:TRP12FBXL20蛋白體
YES1英文名稱:TCTN2FBXL15蛋白體
phospho-YES1 (Tyr426)英文名稱:TBX1FBXL21蛋白體
phospho-YES1(Tyr537)英文名稱:TIE2F-box蛋白家族FBXO7體
Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319)英文名稱:TankyraseF-box蛋白家族FBXO11體
Phospho-ZAP70 (Tyr493)英文名稱:Tubulin-betaF-box蛋白家族FBXO25體
Phospho-Zyxin (Ser142+Ser143)英文名稱:Tubulin-BetaF-box蛋白家族FBXO18體
ZBTB41英文名稱:Tyrosine Hydroxylase (Neuronal Marker)FRG2B蛋白體cGMP英文名稱:Cathepsin K人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi因(GSTpi)免疫試盒
Cubilin英文名稱:Cathepsin D人谷胱甘肽還原酶(GR)免疫試盒
c-Maf英文名稱:Cathepsin H人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)免疫試盒
C18orf56英文名稱:phospho-CaMK2 alpha (Tyr231)人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶TT(GSTπ)免疫試盒
C3orf22英文名稱:Phospho-Caspase-9 (Thr125)人谷胱甘肽(GSH)免疫試盒
C19orf46英文名稱:Phospho-Caspase-9 (Tyr153)人谷酰胺轉(zhuǎn)移酶6體(IgM)免疫試盒
c-Maf英文名稱:Phospho-Beta-Catenin (Ser33 + 37)人谷酰胺轉(zhuǎn)移酶2體(IgG)免疫試盒
CACNA1A英文名稱:Phospho-Beta Catenin (Ser45)人谷酰胺轉(zhuǎn)移酶2體(IgA)免疫試盒
葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測試劑盒說明書原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。