詳細(xì)介紹
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):磷脂酶D(PLD)可見(jiàn)分光光度法
測(cè)試方法:可見(jiàn)分光光度法
規(guī)格 : 50管/48樣
貨號(hào):YS-01S6713
測(cè)定意義
磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰膽堿水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類(lèi)酶的總稱(chēng),廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中,具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。
測(cè)定原理
磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿,膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化氫酶的作用下將4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì),在500nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,無(wú)水乙醇。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
豬環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH/CD38)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒德?tīng)柌加墟呓湍窰uman T Cell Co-inhibitory and Co-stimulatory Receptor IHC Antibody Sampler Kit
豬轉(zhuǎn)錄激活因子-1(ATF-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 釀酒酵母RagD Antibody
豬速激肽受體2(TACR2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒腐殖質(zhì)鏈霉RagD Antibody
豬補(bǔ)體受體2 (CR2/CD21)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 絲衣霉SMARCAL1 (D3P5I) Rabbit mAb
豬可溶性因子受體(sCKR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒美澳型核果褐腐病SimpleChIP® Human GAPDH Promoter Primers
豬G蛋白偶聯(lián)受體37(GPR37)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒阿克蘇海洋桿PKCα (D7E6E) Rabbit mAb (PE Conjugate)
豬成纖維生長(zhǎng)因子19( FGF19)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒綠色木霉HPK1 Antibody
豬單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒阮氏Pan-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D54) XP® Rabbit mAb
豬纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽孢桿Pan-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D54) XP® Rabbit mAb
豬IV D組磷脂酶A2(PLA2G4D)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒構(gòu)巢曲霉Na
豬乙酰膽堿酯酶關(guān)聯(lián)蛋白(ACHAP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 殼Scribble Antibody
豬甘露糖凝集素受體(MBLR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 巴斯德酵母ABCG2 Antibody
豬基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒博伊丁假絲酵母NRCAM (D2H1T) Rabbit mAb
豬肌球蛋白重鏈1(MYH1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 史氏芽孢桿SimpleChIP® Human GAPDH Intron 2 Primers
豬激肽原1(KNG1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 長(zhǎng)枝木霉Phospho-PTPα (Tyr789) Antibody
磷脂酶D(PLD)可見(jiàn)分光光度法間粘附分子-1抗體Human FBL(Fibrillarin) ELISA Kit小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒,
間粘附分子1抗體Human ERβ(Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit大鼠周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒,
間粘附分子-1抗體Human ETRB(Endothelin Receptor B) ELISA Kit大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒,
間粘附分子-1抗體Human ETRA(Endothelin Receptor A) ELISA Kit倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒,
間粘附分子-1抗體Human EXT1(Exostoses 1) ELISA Kit豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒,
親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIF抗體Human F1+2(Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
過(guò)氧化氫酶抗體Human F13(Coagulation Factor XIII) ELISA Kit氯化鎂孔雀綠肉湯(MM,RV Medium)
內(nèi)氯離子通道蛋白4抗體Human F7(Coagulation Factor VII) ELISA KitL-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。