實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作：

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實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
 糖化酵母 Saccharomyces diastaticus球殼 Chaetomium globosum

膽固(標準品) 質量HPLC≥98%，標準品 Cholesterol

 苜蓿中華根瘤宇佐曲 Aspergillus usamii

膽固 質量>95%,BR Cholesterol

 生孢梭 Clostridium sporogenesNR8383(大鼠肺泡巨噬細胞)

膽(標準品) 質量HPLC≥98%，標準品 Cholic acid

 RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum

膽 質量≥98%,BR，無水 Cholic acid

 苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti桿屬 Lactobacillus sp.

黨參炔苷（標準品） 質量僅供鑒別用 Lobetyolin

 人絨間充質成纖維細胞苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti

α-倒捻子(標準品) 質量HPLC≥98%,標準品 α-mangostin

 H9c2大鼠心肌細胞（ATCC來源）TBS

地奧司明(標準品) 質量HPLC≥98%，標準品 Diosimin

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae球亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

地奧司明 質量HPLC≥90%,BR DiosiminNDUFA9英文名稱：LRRC15卷曲螺旋結構域蛋白74B體

NIPA英文名稱：LAR19號染色體開放閱讀框25體

phospho-NIPA(Ser354)英文名稱：Phospho-5-Lipoxygenase(Ser524)19號染色體開放閱讀框42體

NUSAP1英文名稱：LMP219號染色體開放閱讀框44體

Nkx2.5英文名稱：LIMK119號染色體開放閱讀框48體

Noggin英文名稱：LMP719號染色體開放閱讀框50體

NSBP1英文名稱：LH19號染色體開放閱讀框51體

Neurexin 1英文名稱：Laminin alpha 119號染色體開放閱讀框52體
綠豆內源基因PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。