實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作：?

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
 大鼠雪旺氏細胞*培養(yǎng)小鼠畸胎瘤細胞

芬那（標準品） 質(zhì)量含量測定 Mefenamic acid

 宇佐曲 Aspergillus usamii人肺成纖維細胞*培養(yǎng)

化鉀（標準品） 質(zhì)量含量測定 Potassium iodide

  人肝細胞豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna

青蒿琥酯（標準品） 質(zhì)量HPLC≥99%,含量測定 Artesunate

 香菇 Lentinula edodes嗜桿 Lactobacillus acidophilus

硫呤（標準品） 質(zhì)量含量測定 Azathioprine

 植物桿 Lactobacillus plantarumTF-1(人血液白血病細胞)

青蒿琥酯 質(zhì)量HPLC≥98%,BR Artesunate

 熱帶假絲酵母 Candida tropicalis宇佐曲 Aspergillus usamii

舒必利（標準品） 質(zhì)量UV法含量測定 Sulpiride

 褐球固中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii

?。藴势罚?質(zhì)量含量測定 Salbutamol

 大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicumIshikawa(人子宮內(nèi)膜細胞)

水楊鎂（標準品） 質(zhì)量含量測定 Magnesium salicylatePhospho-PLC gamma 2 (Tyr759)英文名稱：Marek's Disease Vaccine, Live6號染色體開放閱讀框132體

PLCG 1英文名稱：MDR1化鈣調(diào)酶B亞B1體

Phospho-PDGFRA(Tyr849)/PDGFRB(Tyr857)英文名稱：Metronidazole羊甾14α-去化酶蛋白體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)英文名稱：MAGE-A4補體C5體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)英文名稱：CAB395號染色體開放閱讀框24體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740)英文名稱：MAVS5號染色體開放閱讀框42體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)英文名稱：MCSF Receptor5號染色體開放閱讀框49體

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)英文名稱：MTA15號染色體開放閱讀框35體
人GAPDH基因PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。