ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： 
     1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

詳細(xì)參考數(shù)值：
產(chǎn)品名稱：瘦素ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Leptin
檢測(cè)范圍：0.5ng/mL~16ng/mL
貨號(hào)：YS-E97324
性狀：盒狀液體。
實(shí)驗(yàn)方法：競(jìng)爭(zhēng)法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍：科學(xué)研究。
樣品形式：血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期：6個(gè)月，本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次，請(qǐng)放心購(gòu)買！
庫(kù)存信息： *√質(zhì)量保證√庫(kù)存充足√
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
優(yōu)點(diǎn)：
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高，可靠性強(qiáng)
4、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒，免費(fèi)代測(cè)
5、技術(shù)服務(wù)要求：專業(yè)，規(guī)范，高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測(cè)指標(biāo)齊全：炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，科研隊(duì)伍，良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴。

50T 人白血病Major-BCR-ABL融合基因PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

10 mg DiO（細(xì)胞膜綠色熒光探針） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

1瓶 SF736細(xì)胞株 SF736 低溫運(yùn)輸和保存

100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0  DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

1g 次黃嘌呤 Hypoxanthine 室溫保存

48 T 堿性磷酸酶測(cè)試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

250U Phusion DNA聚合酶 Phusion DNA Polymerase -20℃保存

25mL 超敏化學(xué)發(fā)光（HRP）檢測(cè)試劑盒 Ultrasensitive ECL Kit 4℃保存

50T 流感嗜血桿菌B型PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

5g  Pentobarbital Sodium Salt  室溫保存

50mL 無(wú)內(nèi)毒素水  

100mL HEPPS Buffer,0.2M,pH8.0  HEPPS Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

2 ug pAd/CMV/V5-DEST pAd/CMV/V5-DEST 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

瘦素ELISA檢測(cè)試劑盒1%NaCl葡萄糖（產(chǎn)氣） 用于鑒別耐氯化鈉的弧菌利用糖源的能力。（鑒定霍亂弧菌） 20支/盒

1%NaCl水楊素生化鑒定管 用于鑒別耐氯化鈉的弧菌利用糖源的能力（鑒別霍亂弧菌） 20支/盒

1%NaCl西蒙氏杞櫞酸鹽生化鑒定管 用于鑒別耐氯化鈉的弧菌對(duì)杞櫞酸鹽和無(wú)機(jī)銨的利用能力。（鑒定霍亂弧菌） 20支/盒

1%NaCl蔗糖生化鑒定管 用于鑒別耐氯化鈉的弧菌利用糖源的能力。 20支/盒

1%蛋白胨水 用于樣品的稀釋。（GB 4789.13-2010） 250g

1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 用于白色念珠菌芽管試驗(yàn)的培養(yǎng)(2010版中國(guó)藥典) 250g

1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 用于白色念珠菌芽管試驗(yàn)的培養(yǎng) 100g

1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基配套試劑 每支添加于1000mL的1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基（021105）中. 10支/盒

10% FeCl3試劑(苯丙氨酸試劑) 用于苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn). 10ml/支

10%NaCl胨水生化鑒定管 用于弧菌的耐鹽試驗(yàn)。 20支/盒

10%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯 用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)。 90mmX20個(gè)

10%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯 用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)。 225ml/X10袋