詳細介紹
草地夜蛾卵巢細胞;Sf9價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 草地夜蛾卵巢細胞;Sf9價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 半貼壁
特征特性 該細胞對丫紋夜蛾、桿狀病毒敏感,可用于桿狀病毒的復制。
培養(yǎng)條件 10%FBS
傳代方法 1:
5 or greater
傳代情況
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
支原體檢測
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-DR5/APO-2L/TRAILR2/CD262/FITC 熒光素標記細胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-MDM2/FITC 熒光素標記雙微體2癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CA IX 碳酸酐酶9抗體 規(guī)格 0.1ml
CGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原 0.5mg
HELT 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SEC14 like protein 2/Squalene transfer protein α維生素E相關蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-MDM2/FITC 熒光素標記雙微體2癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-6 人白介素-6Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CGB 嗜鉻粒素B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NUP54 NUP54抗體 規(guī)格 0.2ml
BCA(bicinchoninic acid) BCA蛋白濃度測定試劑盒 60ml
TCF3 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子3抗體(螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47) 0.2ml
Thromboxane synthase 英文名稱: 血栓素合成酶抗體 0.2ml
Anti-CGB 嗜鉻粒素B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgG 0.1ml
FISH 英文名稱: FISH蛋白抗體 0.2ml
異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體 Anti-DCP 1ml
Anti-PAX5/FITC 熒光素標記配對盒基因5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-TUBB3(Ser172) 磷酸化神經(jīng)細胞特異性微管蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti- Rb IgM/FITC 熒光素標記羊抗兔IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
CD20(抗原) CD20(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Cbx8 染色質(zhì)結合蛋白Cbx8抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHB12 原鈣粘蛋白β12抗體 規(guī)格 0.2ml
ENG Kit Human 人 Endoglin / CD105 / ENG ELISA配對抗體 ELISA
TUSC3 英文名稱: 前列腺癌抑癌蛋白3抗體 0.2ml
Collagen IV 英文名稱: IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體 0.1ml
Anti-Cbx8 染色質(zhì)結合蛋白Cbx8抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml