詳細介紹
兔腎細胞;RK13價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 兔腎細胞;RK13價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 RK13細胞初期建系于1959年,衍生于5周齡兔的胰酶消化腎細胞。該細胞系對風疹病毒(Rubella virus)敏感,病毒感染產生致細胞病變(CPE)。研究發(fā)現(xiàn)RK13細胞可作為多種病毒的敏感宿主,支持B病毒、單純皰疹病毒(Herpes simplex virus)、偽狂犬病毒(Pseudorabies virus)、痘苗病毒(Vaccinia virus)、兔痘病毒(Rabbitpox virus)、粘液瘤病毒(Myxoma virus)
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-CXCR7/RDC1/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-LFABP/FABP-2 /FITC 熒光素標記肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh caspase-8 subunit p18 半胱氨酸蛋白酶8抗體 規(guī)格 0.2ml
ER- Alpha /ER alpha peptide 雌激素受體α抗原 0.5mg
HAGH 英文名稱: 羥酰谷胱甘肽水解酶蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SKALP/Elafin 彈性蛋白酶抑制劑抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-LFABP/FABP-2 /FITC 熒光素標記肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit 人瘦素受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-P53 (Ser33) 磷酸化抑制基因P53抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSP27/HspB1/HSP25 熱休克蛋白27抗體 規(guī)格 0.1ml
ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體 96T
Parkin 英文名稱: 帕金蛋白抗體 0.1ml
CLLD7 英文名稱: 鳥嘌呤核苷酸交換因子CLLD7抗體 0.2ml
Anti-phospho-P53 (Ser33) 磷酸化抑制基因P53抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗猴IgM 0.1ml
FBXO31 英文名稱: F-box蛋白家族FBXO31抗體 0.2ml
周期素C抗體 Anti-Cyclin C 0.1ml
Anti-PADI4/PAD4 /FITC 熒光素標記關節(jié)炎相關基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-VAV3(Tyr173) 磷酸化鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/Biotin 生物素化兔抗大鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit 人心型脂肪酸結合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-p70 S6 Kinase/P70 Beta1 核糖體S6蛋白激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD11B1/HSD1 羥基類固醇脫氫酶11β1抗體 規(guī)格 0.1ml
DPP IV (Mouse dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit 小鼠二肽基肽酶Ⅳ 96T
P4HTM 英文名稱: 脯酸水解酶4抗體 0.1ml
C1orf76 英文名稱: 神經母細胞瘤源性分泌蛋白抗體 0.2ml
Anti-p70 S6 Kinase/P70 Beta1 核糖體S6蛋白激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml