詳細介紹
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)價格
形態(tài)特性 膠質(zhì)、星形細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞用于可復制逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測。對鼠白血病病毒、貓白血病毒、獼猴病毒等較敏感。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 新生牛血清,10%
傳代方法 1:
5傳代,每周換液2-3次
傳代情況 P26
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)價格貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-CSMD1/FITC 熒光素標記抑癌基因CSMD1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC 熒光素標記磷酸化核纖層蛋白A/C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CCDC107 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白107抗體 規(guī)格 0.2ml
Gax(growth arrest-specific homeobox) 生長終止特異性同源盒基因抗原 0.5mg
H5N1 Matrix Protein 2 英文名稱: A型病毒H5N1-M2蛋白抗體 1ml
Rhesus antibody Rh Slc4a7/Nbcn1 碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC 熒光素標記磷酸化核纖層蛋白A/C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LH(Luteinizing Hormone) 促黃體生成素抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Aggrecan1/ADAMTS-4 軟骨蛋白聚糖抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CAMK4(Thr196 + Thr200) 磷酸化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體 規(guī)格 0.1ml
Biotin阻斷劑 10ml Sigma原料
VHL 英文名稱: 腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體(逢希伯-林道氏病) 0.1ml
DcR2 英文名稱: 誘捕受體2抗體 0.1ml
Anti-Aggrecan1/ADAMTS-4 軟骨蛋白聚糖抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GNG2 英文名稱: G蛋白γ2抗體/鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白γ2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKS1A 錨蛋白重復及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Inhibin Beta B /FITC 熒光素標記抑制素βB抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-human IgG whole serum 兔抗人IgG抗血清 規(guī)格 1ml
Anti-RPLP0/FITC 熒光素標記酸性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)價格Anti-phospho-STAT1(pThr701)/FITC 熒光素標記抗磷酸化信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM 小鼠抗人IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
G蛋白偶聯(lián)受體-2抗體 Anti-GASR 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Bio 生物素標記的驢抗兔IgG 0.1ml
FKBP25 英文名稱: 肽基脯酸異構(gòu)酶酶FKBP25抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SMC1 (Ser360) 磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-human IgM 小鼠抗人IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg