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詳細(xì)介紹
大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞；RS1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞；RS1價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一大鼠的皮膚組織。2007年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%FBS
傳代方法 1：
2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-HBV/pre S1/S2 protein /FITC 熒光素標(biāo)記抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PDGF-A/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子-A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BAT3/BAG6 Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體 規(guī)格 0.2ml
5-HTR2A 5-羥色胺受體2A抗原 0.5mg
GSK-3 beta (NT) 英文名稱： 糖原合酶激酶-3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-PDGF-A/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子-A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Lp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD107a/LAMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.5ml
Anti-TM 甲狀腺微粒體抗體(TM抗體) 96T
MRPS4 英文名稱： 線粒體核糖體蛋白S4抗體 0.1ml
ABHD14B 英文名稱： 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體 0.2ml
Anti-CD107a/LAMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
Galectin 12 英文名稱： 半乳糖凝集素12抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APAF1(CT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端) 規(guī)格 0.1ml
Anti-IL-17F/IL-24/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-17F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-RAR- Beta /FITC 熒光素標(biāo)記維甲酸受體-β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-FAK (Tyr861) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化粘著斑激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗IgM (10或15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
纖維母細(xì)胞生長因子4抗體 Anti-FGF3/HSTF1/HBGF-4 0.1ml
Donkey Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
FPGT 英文名稱： 巖藻糖1磷酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-SYN1(Ser549) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗IgM (10或15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
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