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詳細(xì)介紹
大鼠肺細(xì)胞；WTRL1價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 大鼠肺細(xì)胞；WTRL1價格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性大白鼠的肺組織。1984年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199：
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1：
2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-HBME-1 /FITC 熒光素標(biāo)記間質(zhì)細(xì)胞HBME1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗體 規(guī)格 0.2ml
5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原 0.5mg
GRO Alpha 英文名稱： 生長調(diào)節(jié)致癌基因-1抗體GROa 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LTA(Human lipoteichoic acids) ELISA Kit 人脂磷壁酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-PEG10 肝癌高表達(dá)基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HIV p55+NP7 艾滋病病毒抗體 規(guī)格 0.2ml
PI Ab-IgG/IgM(Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 96T
PMFBP1 英文名稱： 多胺調(diào)制因子結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
CNOT8 英文名稱： 細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體 0.2ml
Anti-PEG10 肝癌高表達(dá)基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG 兔抗豬IgG 1mg
FASTK 英文名稱： Fas活化的絲/蘇酸激酶抗體 0.1ml
hypothetical protein抗體 Anti-Hypothetical protein 0.2ml
Anti-Phospho-PLK1 (Thr210)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Rb (Ser608) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-human IgG Whole serum 羊抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Anti-HSP27/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記熱休克蛋白-27抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-PKA C (Thr197)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶C亞性抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體 規(guī)格 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLE1 英文名稱： 核孔蛋白GLE1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-mouse IgG whole serum 兔抗小鼠IgG抗血清 規(guī)格 1ml
Anti-Phospho-PKA C (Thr197)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶C亞性抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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