詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;HBsAg-5H2價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;HBsAg-5H2價格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-MSLN /FITC 熒光素標(biāo)記間皮素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
5-羥色胺受體1A抗體 Anti-5-HTR1A 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml
GLIPR2 英文名稱: 腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PSD93 突觸后密度蛋白93抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
N-AChR ELISA Kit 大鼠煙堿型乙酰膽堿受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T96T
Anti-Thymosin Alpha-1 胸腺肽α1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Glypican 6 磷脂?;嫉鞍拙厶?6抗體 規(guī)格 0.2ml
TCC C5b-9 ELISA Kit 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9 96T
NSMAF 英文名稱: 中性鞘磷脂相關(guān)因子抗體 0.1ml
Adrenomedullin 英文名稱: 腎上腺髓質(zhì)素抗體(N端20肽) 0.1ml
Anti-Thymosin Alpha-1 胸腺肽α1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SELL Kit Mouse 小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL ELISA配對抗體 ELISA
TAF12 英文名稱: TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PBEF (CT) 內(nèi)脂素/前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子-2(C端抗體) 規(guī)格 0.1ml
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
C3orf30 英文名稱: 3號染色體開放閱讀框30抗體 0.2ml
Anti-CXCR6 細(xì)胞表面趨化因子受體6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-Defensin alpha 4 /FITC 熒光素標(biāo)記防御素α4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser80)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2 細(xì)胞粘附分子2 規(guī)格 0.2ml
Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原 0.5mg
phospho-HSF1(Ser307) 英文名稱: 磷酸化熱休克因子1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Septin 2/Sept2/NEDD5 神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser80)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml