細胞名稱  小鼠小腦組織細胞；C8-D1A培養(yǎng)
形態(tài)特性 神經(jīng)元樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該永生化細胞系源自出生8天小鼠小腦組織，由B Pessac, D Trisler建立。該細胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細胞特征。該細胞為GFAP陽性細胞，除此之外，沒有檢測到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細胞的分子標記。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C7

凍存條件 基礎(chǔ)
小鼠小腦組織細胞；C8-D1A培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Polycystin 1/FITC 熒光素標記多囊腎蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat Anti-Chicken Whole serum 羊抗雞IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體 Anti-IASPP 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG 兔抗人IgG 1mg

fowl typhoid and pullorum disease 英文名稱： 雞白痢、雞傷寒抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Raptor (Ser792) 磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-Chicken Whole serum 羊抗雞IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-AKT3 (Ser472) 磷酸化蛋白激酶AKT3抗體 規(guī)格 0.1ml

Myosin skeltal,muscle 濃縮液 0.1ml 進口分裝

Ulex Europaeus Lectin 1 英文名稱： 荊豆凝集素1抗體 0.1ml

DACH2 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體 0.2ml

Anti-Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor) ELISA Kit 人可溶性壞死因子α受體 96T

MICB 英文名稱： MHC I類鏈相關(guān)蛋白B 0.1ml

Rhesus antibody Rh EST1A 端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體 規(guī)格 0.2ml

FN ELISA Kit 大鼠纖連蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

AEBP1 英文名稱： 脂肪細胞增強結(jié)合蛋白1 0.2ml

Anti-Bax/FITC 熒光素標記Bax抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-ACE1/FITC 熒光素標記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Fibrinopeptide A 纖維蛋白肽A/血纖肽抗體 規(guī)格 0.2ml

BrdU ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶 96T

Mannose Receptor 英文名稱： 巨噬細胞甘露糖受體抗體 0.2ml

ACSM3 英文名稱： 丁?；o酶A合成酶3抗體 0.2ml

Anti-ACE1/FITC 熒光素標記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。