化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛源性成分核酸檢測試劑盒48T
貨號(hào):YS-01P6378
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 序列資源豐富，除公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
楊梅 98%2,5-二甲基吡 98%小鼠降鈣(CT)免疫試劑盒
乙戊酯 ≥99%丁位十二內(nèi)酯 98%小鼠性磷(ALP)免疫試劑盒
2,3-丁二 98%乙癸酯 98%小鼠性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
丁丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)乙二甲基原酯 99%小鼠甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒
丁丁酯 >99.0%(GC)乙二甲基原酯 98%, FCC, Kosher 小鼠甲狀腺(T4)免疫試劑盒
甲芐酯 CP,98.0%2,6-二甲基-2-庚 99%小鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒
甲芐酯 >99.0%(GC)癸乙酯 99%小鼠甲狀腺過氧化物(TPO)免疫試劑盒
甲芐酯 ≥99%, FCC肉桂乙酯 99%小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒
乙芐酯 99%水楊乙酯 99%小鼠甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
乙芐酯 ≥99%, FCC, F楊乙酯 ≥99%, FCC小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒
乙芐酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.7% (GC菠蘿乙酯 99%小鼠甲基化(Methylase)免疫試劑盒
甲丁酯 95%菠蘿乙酯 ≥99%, FCC, Kosher小鼠己糖激(HK)免疫試劑盒
甲丁酯 Standard for GC乙基香蘭 98%小鼠低密度脂蛋白受體(VLDLR)免疫試劑盒
仲丁 99%母菊酯 98%小鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
乳丁酯 98%0.99小鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒
牛源性成分核酸檢測試劑盒48T人白三烯B4（LTB4） ELISA試劑盒,LTB4 ELISAN,N,N',N'-四基聯(lián)磷化腺單磷活化蛋白激α2抗體
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體（snRNP/Sm）ELISA試劑盒,N,N,N',N'-四基聯(lián)磷化腺單磷活化蛋白激α2抗體
小鼠癌胚抗原（CEA/CD66）ELISA試劑盒,(R)-1,1′-聯(lián)萘-2,2′-二基磷酰磷化雄激受體抗體
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）ELISA試劑盒,(R)-1,1′-聯(lián)萘-2,2′-二基磷酰磷化雄激受體抗體
小鼠抗復(fù)合物（TAT）ELISA試劑盒,雙(六乙酰酮)合銅(II)磷化雄激受體抗體
小鼠Ⅱ型膠原（Col Ⅱ）ELISA試劑盒,雙(六乙酰酮)合銅(II)磷化雄激受體抗體
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體（gp210）ELISA試劑盒,3-甲氧基硫酚錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激ANKK1抗體
大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子（TGSF）ELISA試劑盒,3-甲氧基硫酚磷化內(nèi)收蛋白抗體
化工儀器網(wǎng)