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詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人卵巢腺癌細(xì)胞；OVCAR-3培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 OVCAR-3細(xì)胞源自一名60歲白人女性卵巢腫瘤組織，由T.C.Hamiltonyu建系于1982年。該細(xì)胞帶有雌、雄激素受體。對阿霉素，順氯氨鉑，(左旋)苯丙氨酸氮芥有一定抗藥性，適用于卵巢癌的抗藥性研究。OVCAR-3染色體數(shù)量在亞三倍體范圍內(nèi)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C13
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人卵巢腺癌細(xì)胞；OVCAR-3培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-TAK1/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 Anti-ROCK1 0.2ml
SREBP-2 英文名稱： 膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
ETS1 associated protein II 英文名稱： ETS1相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-MK2(Ser226) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
SP ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ZCWCC1 ZCWCC1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fx1A 腎刷狀緣抗體 規(guī)格 0.2ml
IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子2 96T
NMDAR2B 英文名稱： 谷酸受體2B抗體 0.1ml
APOL4 英文名稱： 載脂蛋白L4抗體 0.2ml
Anti-ZCWCC1 ZCWCC1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT) 促甲狀腺素受體(抗原) 0.5mg
HLX1 英文名稱： 同源異型盒基因HLX1蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh C20orf195 20號染色體開放閱讀框195抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-HB-EGF/DTSF/FITC 熒光素標(biāo)記肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh S100A4 S100A4抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-MPO /FITC 熒光素標(biāo)記髓過氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MMP-24 基質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin beta 7 整合素β7抗體 規(guī)格 0.1ml
anti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗甲型肝炎病毒IgM抗體 96T
PIBF1 英文名稱： 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體 0.2ml
C8orf31 英文名稱： 8號染色體開放閱讀框31抗體 0.2ml
Anti-MMP-24 基質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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