細胞名稱  人卵巢癌細胞；Anglne培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 Anglne細胞由德國學者建系。該細胞系主要用于卵巢癌的病理學研究，抗腫瘤藥物篩選。研究證明，Anglne細胞系為貼壁生長，較COC1細胞系培養(yǎng)方便。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C74

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR STR鑒定

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
人卵巢癌細胞；Anglne培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-Vimentin/FITC 熒光素標記波形蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

周期素依賴激酶1抗體 Anti-Cdc2/P34CDC2/CDK1 0.1ml

SUFU/Suppressor of Fused 英文名稱： 抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體 0.2ml

ESAT6 英文名稱： 結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GADD153 (Ser30) 磷酸化GADD153抗體 規(guī)格 0.1ml

CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信號識別顆粒抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-IGFBP3 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAL/MPV17 T淋巴細胞成熟相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羥基維生素D3 96T

RNF39 英文名稱： 環(huán)指蛋白39抗體 0.2ml

CNPase 英文名稱： C型鈉尿肽抗體 0.1ml

Anti-IGFBP3 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪酸激酶2 96T

RNF35 英文名稱： 環(huán)指蛋白35抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh MC3 Receptor 黑素皮質(zhì)素受體3抗體 規(guī)格 0.2ml

SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

phospho-Caseine Kinase 1 alpha (Thr1194) 英文名稱： 磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體 0.1ml

Anti-HPV16-E7 人類狀瘤病毒16-E7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
bFGF-6 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子6Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-APP/FITC 熒光素標記APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM50A FAM50A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

ANG-4 ELISA Kit 大鼠血管生成素4 96T

MYCBPAP 英文名稱： MYCBPAP抗體 0.1ml

ATG9A 英文名稱： 自噬相關(guān)蛋白9A抗體 0.2ml

Anti-APP/FITC 熒光素標記APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml