詳細(xì)介紹
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞于1992年從一位50歲的白人女性乳腺導(dǎo)管癌組織中分離建立,該患者曾有平滑肌肉瘤的病史,其母親死于乳腺癌;該細(xì)胞癌基因her2/neu-,p53+;上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物EGP2(上皮糖蛋白2)和CK19陽性,ER和PR陰性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;4.5g/L Glucose+1mM丙酮酸鈉
傳代方法 1:2~1:4傳代;3~5天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:12,14;D16S539:10,14;D18S51:15;D19S433:13,15;D21S11:27,28;D2S1338:17,19;D3S1358:18;D5S818:9;D7S820:10;D8S1179:8,10;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:9,12;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-TNFSF14/LIGHT/CD258/FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子配體超家族成員14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Toll樣受體4抗體 Anti-TLR4 0.1ml
5HT3A Receptor 英文名稱: 5-羥色胺受體3A抗體 0.2ml
E1 glycoprotein 英文名稱: 風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-JUP(Tyr550) 磷酸化γ連環(huán)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GDNF Receptor alpha 2 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體alpha 2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GLUR3/GRIA 3 谷氨酸受體3抗體 規(guī)格 0.1ml
Bcl3(human B-cell leukemia/lymphoma 3) ELISA Kit 人B細(xì)胞淋巴瘤因子3 96T
NDUFA1 英文名稱: NADH氧化還原酶輔酶1抗體 0.1ml
ATP5A 英文名稱: ATP5A抗體 0.1ml
Anti-GDNF Receptor alpha 2 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體alpha 2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒通用96T0.312-20 ng/mL小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒,英文名:COL1α2 ELISA Kit人酪蛋白(Beta-casein) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA試劑盒,英文名:MMP-9/Gelatinase B ELISA KiISA Kit for Human CD5 antigen-like小鼠鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒,英文名:CAM ELISA Kit人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒,英文名:LIFR ELISA KiISA Kit for Human Cholesterol 7-alpha-monooxygenase小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)ELISA試劑盒,英文名:WNT10B ELISA Kit人降鈣素(CT)ELISA試劑盒人96T12.5-800 pg/mL小鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒,英文名:17-OHP ELISA KiISA Kit for Human Deleted in malignant brain tumors 1 protein小鼠組織蛋白酶L(CTSL)ELISA試劑盒,英文名:CTSL ELISA Kit
ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor-related protein 11大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒,英文名:MUC1 ELISA Kit人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒,英文名:IGFBP2 ELISA KiISA Kit for Human Epithelial cell adhesion molecule小鼠吻素1(KISS1)ELISA試劑盒,英文名:KISS1 ELISA Kit人纖維膠凝蛋白2(FCN2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠神經(jīng)型一氧化氮合酶()ELISA試劑盒,英文名: ELISA KiISA Kit for Human Fibroblast growth factor 6小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA試劑盒,英文名:uPAR ELISA Kit人谷氨酸-半胱氨酸連接酶催化亞基 (GCLC) ELISA試劑盒人96T0.156-10 nmol/L小鼠間皮素(MSLN)ELISA試劑盒,英文名:MSLN ELISA KiISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F小鼠骨成型蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒,英文名:BMP4 ELISA Kit
紅細(xì)胞裂解液(10X) 10ml
ZBT24 英文名稱: 鋅指蛋白450抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml
GSR/GRase(glutathione reductase) 谷胱甘肽還原酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Phospho-Dab1 (Tyr198) 英文名稱: 磷酸化磷脂蛋白受體Dab1抗體 0.1ml
SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (FITC) Mouse
Fas/Apo-1 human 人凋亡相關(guān)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AU1 tag AU1 tag標(biāo)簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Noxa Noxa蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
AChRab-M1 ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿受體-M1抗體 96T
TAS2R49 英文名稱: 味覺2型受體蛋白家族49抗體 0.2ml
C6orf204 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框204抗體 0.2ml
Anti-AU1 tag AU1 tag標(biāo)簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml