詳細(xì)介紹
人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3MIE8價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3MIE8價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣;多角
品牌 貼壁生長
特征特性 母系PC-3M,單細(xì)胞克隆法分離鑒定的高轉(zhuǎn)移亞系;裸鼠體內(nèi)成瘤率100%,轉(zhuǎn)移率100%。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:14,15;D19S433:14;D21S11:29,31.2;D2S1338:18,20;D3S1358:16,20;D5S818:13;D7S820:8,11;D8S1179:13;FGA:24,25;TH01:6,7;TPOX:8,9;vWA:17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172) /FITC 熒光素標(biāo)記NF-κB活化激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1) 核受體輔助抑制因子(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 SLC34A2/NaPi-2b 0.1ml
SMC6 英文名稱: 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體 0.2ml
E.coli O157:H7 英文名稱: 腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MARK4(Ser423) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體 規(guī)格 0.1ml
N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1) 核受體輔助抑制因子(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
trypsin ELISA Kit 大鼠胰蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AU5 tag/FITC 熒光素標(biāo)記AU5 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh F1 operon positive regulatory protein(NT) 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端) 規(guī)格 0.2ml
NE (Rabbit neutrophil elastase) ELISA Kit 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶 96T
10-Mar 英文名稱: 膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體 0.1ml
ATG13 英文名稱: 自噬相關(guān)蛋白13抗體 0.2ml
Anti-AU5 tag/FITC 熒光素標(biāo)記AU5 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒人96T0.47-30 ng/mL小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒,英文名:S100A7 ELISA Kit人Rho-GTP酶激活蛋白21(ARHGAP21)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒,英文名:STX2 ELISA KiISA Kit for Human Adiponectin小鼠趨化因子(CC基序)配體2(MRC2)ELISA試劑盒,英文名:MRC2 ELISA Kit人易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)ELISA試劑盒,英文名:sVEGF R1/sFlt1 ELISA KiISA Kit for Human Coxsackievirus and adenovirus receptor小鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒,英文名:CK-MB ELISA Kit人CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒,英文名:Ub ELISA KiISA Kit for Human T-cell surface antigen CD2小鼠白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒,英文名:IL-5 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Tyrosine-protein kinase JAK2小鼠Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試劑盒,英文名:PⅠCP ELISA Kit人細(xì)胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒,英文名:S-100 ELISA KiISA Kit for Human Carnitine O-palmitoyltransferase 1, liver isoform小鼠脂聯(lián)素(Adiponectin/Acrp30)ELISA試劑盒,英文名:Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit人二肽基肽酶9(DP9)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠組氨酸豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒,英文名:HRG ELISA Kit人EF手結(jié)構(gòu)域蛋白D2(EFHD2) ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)ELISA試劑盒,英文名:TNNT2 ELISA Kit人高親和力γ免疫球蛋白FC段受體I(IgG Fc receptor I)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠神經(jīng)介素B(NMB)ELISA試劑盒,英文名:NMB ELISA Kit人生長激素釋放肽(GHRP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)ELISA試劑盒,英文名:LOXL1 ELISA Kit
甲基綠染色液-綠色 12ml 配合DAB,New Fuchsin,F(xiàn)uchsin使用
VAT 英文名稱: 囊泡乙酰膽堿通道抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-cdc25A (Ser178) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格 0.1ml
Integrin Beta5 整合素β5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
DUSP5 英文名稱: 雙特異性蛋白磷酸酶5抗體 0.2ml
Anti-Adiponectin Receptor 1 脂聯(lián)素受體-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PRSS(Human serine protease) ELISA Kit 人絲氨酸蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NDRG4 抑癌基因NDRG4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-33 白介素33抗體 規(guī)格 0.1ml
ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit 小鼠乙酰膽堿 96T
p107 英文名稱: 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml
C22orf29 英文名稱: 22號(hào)染色體開放閱讀框29抗體 0.2ml
Anti-NDRG4 抑癌基因NDRG4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml