詳細(xì)介紹
人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 1983年由谷淑燕、孔繁裔等建系;源自人鼻咽低分化鱗癌組織;原代細(xì)胞胰蛋白酶消化,48小時(shí)開(kāi)始生長(zhǎng),*傳代20天。裸鼠體內(nèi)移植100%成瘤。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12,13.3;D16S539:9,10,11;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:27,30;D2S1338:17,23;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:10,12;D8S1179:12,17;FGA:18,21;TH01:7,9;TPOX:8,12;vWA:14,16;
同工酶
染色體 93~100,相互易位較多
使用權(quán)限 A類(lèi)
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-VWF/PE 熒光素PE標(biāo)記血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類(lèi)表皮生長(zhǎng)因子域7抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
P53凋亡刺激蛋白2抗體 Anti-ASPP2 0.1ml
ZNF415 英文名稱: 鋅指蛋白415抗體 0.2ml
DUX3 英文名稱: DUX3蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-EIF4EBP1(Ser100) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類(lèi)表皮生長(zhǎng)因子域7抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA KIT 小鼠特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標(biāo)記CD26抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Dysferlin Dysferlin蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
ADV IgM XI 腺病毒 IgM Ⅺ型(間接法二步法)
MMP-28 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶28抗體 0.2ml
ADM R 英文名稱: 腎上腺髓質(zhì)素受體抗體 0.1ml
Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標(biāo)記CD26抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人CD163抗原(CD163)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒,英文名:C5a ELISA KiISA Kit for Human Leucyl-cystinyl aminopeptidase大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒,英文名:LPL ELISA Kit人促黃體生成素亞基β(Lutropin beta chain)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒,英文名:FDP ELISA KiISA Kit for Human Cytochrome c oxidase subunit 3大鼠胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒,英文名:PP ELISA Kit人肌球蛋白重鏈11(MYH11)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)ELISA試劑盒,英文名:proNGF ELISA KiISA Kit for Human Matrilysin大鼠內(nèi)毒素(Endotoxin)ELISA試劑盒,英文名:Endotoxin ELISA Kit人糖皮質(zhì)激素受體(GR)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒,英文名:TPO-Ab ELISA Kit
人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒,英文名:L-Selectin/CD62L ELISA KiISA Kit for Human Oxidized low-density lipoprotein receptor 1大鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒,英文名:CsA ELISA Kit人泛連接蛋白(Pannexin-1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒,英文名:sPLA2 ELISA KiISA Kit for Human Putative peptide YY-3大鼠補(bǔ)體片斷3(C3)ELISA試劑盒,英文名:C3 ELISA Kit人蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒,英文名:βGAL ELISA KiISA Kit for Human Alpha-type plaet-derived growth factor receptor大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒,英文名:Col Ⅱ ELISA Kit人視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)ELISA試劑盒,英文名:NAP3 ELISA Kit
淋巴細(xì)胞分離液(小鼠、大鼠、豬、兔等) 250ml
zbtb11 英文名稱: 鋅指蛋白913抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser129) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml
A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Dab1 英文名稱: 磷脂蛋白受體Dab1抗體 0.1ml
SERPINF2 SerpinF2 兔單抗 (PE) Human
ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人細(xì)胞間粘附分子1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GRM5/mGluR5 促代謝型谷氨酸受體5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMS21/NSE2 E3連接酶MMS21蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 96T
RNF40 英文名稱: 環(huán)指蛋白40抗體 0.2ml
CD47 英文名稱: 整合素相關(guān)蛋白CD47 0.1ml
Anti-GRM5/mGluR5 促代謝型谷氨酸受體5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml