詳細介紹
細胞名稱 人髓母細胞瘤細胞;D341Med培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞系是1984年由Friedman等建立的;在裸鼠體內可以成瘤。該細胞系中纖維原蛋白、谷氨酰胺合成酶、神經元*烯醇酶陽性,但神經膠質纖維蛋白、S-100蛋白陰性;UJ13A單克隆抗體檢測該細胞神經外胚層抗原陽性;c-myc癌基因高表達。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA+1mM丙銅酸鈉
傳代方法 維持細胞濃度在 0.4~1×106 cells/ml,每周換液2~3次。
傳代情況 C9
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:11,13;D16S539:12,14;D18S51:12,17;D19S433:13;D21S11:30,31;D2S1338:17;D3S1358:16,18;D5S818:11,12;D7S820:9,13;D8S1179:14;FGA:19,23;TH01:6,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,18;
同工酶
染色體 45~48,XY
人髓母細胞瘤細胞;D341Med培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-Gentamicin/Gold 膠體金離子標記兔慶大霉素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml(35nm-40nm)
DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關蛋白激酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
銜接蛋白γ抗體 Anti-γ-Adaptin 0.1ml
Z DNA binding protein 英文名稱: Z DNA結合蛋白抗體 0.2ml
DULLARD 英文名稱: DULLARD蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser105) 磷酸化雌激素受體β抗體 規(guī)格 0.1ml
DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關蛋白激酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促甲狀腺素受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CA II 碳酸酐酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDCD2L/MGC13096 程序性細胞死亡2抗體 規(guī)格 0.2ml
IL6R Kit Human 人 IL6R / CD126 ELISA配對抗體 ELISA
TRPM4 英文名稱: 瞬時受體電位離子通道蛋白4抗體(M亞家族) 0.2ml
CXCL14 英文名稱: CXC趨化因子14抗體 0.1ml
Anti-CA II 碳酸酐酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒,英文名:IL-21 ELISA KiISA Kit for Human Steryl-sulfatase大鼠信號素3A(SEMA3A)ELISA試劑盒,英文名:SEMA3A ELISA Kit人分泌性卷曲相關蛋白4(sFRP-4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠絲蛋白結合LIM蛋白1(FBLIM1)ELISA試劑盒,英文名:FBLIM1 ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-2大鼠凝血因子Ⅵ(F6)ELISA試劑盒,英文名:F6 ELISA Kit人類胰蛋白酶γ(Tryptase gamma)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠甲狀腺素受體α(THRα)ELISA試劑盒,英文名:THRα ELISA Kit人胰蛋白酶(Tryptase-1)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒,英文名:rT3 ELISA Kit人無翅型MMTV整合位點家族成員5B(WNT5B)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠白介素18結合蛋白(IL18BP)ELISA試劑盒,英文名:IL18BP ELISA Kit
人β-防御素1(β-DF1)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠血紅素氧合酶1(HO1)ELISA試劑盒,英文名:HO1 ELISA Kit豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒,英文名:HIS ELISA Kit人腺瘤性結腸息肉病蛋白(Protein APC)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒,英文名:OSM ELISA Kit人天青殺素(Azurocidin)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒,英文名:GSK ELISA Kit人嗜乳脂蛋白亞科2成員A1(Butyrophilin subfamily 2 member A1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒,英文名:LR/Ob-R ELISA Kit人細胞色素P450 3A5(Cytochrome P450 3A5)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒,英文名:ACV-A ELISA Kit人補體蛋白2(C2)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 ng/mL小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒,英文名:SOD ELISA Kit
免疫組化筆 支 進口
Wnt6 英文名稱: 信號通路Wnt6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CDK2 (Thr160) 磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DAAM2 英文名稱: 形態(tài)發(fā)生紊亂關聯激活因子2抗體 0.1ml
Anti-AD7c-NTP 神經絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上皮源性因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD56/NCAM1 CD56抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh P2X2/ATP receptor 嘌呤受體P2X2抗體 規(guī)格 0.1ml
ACBD6 Kit Human 人 ACBD6 ELISA配對抗體 ELISA
TAAL6 英文名稱: 相關抗原L6抗體 0.2ml
COLEC11 英文名稱: 凝集蛋白家族11抗體 0.2ml
Anti-CD56/NCAM1 CD56抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml