詳細(xì)介紹
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞產(chǎn)生高水平的黏液素MUC-1 mRNA,低水平的MUC-2 mRNA,但不表達(dá)MUC-3基因;表達(dá)雌激素受體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:4~1:6傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:9;D16S539:11;D18S51:13,14;D19S433:13,14;D21S11:31;D2S1338:16,25;D3S1358:15,16;D5S818:13;D7S820:10,11;D8S1179:11,13;FGA:20,22;TH01:7,9.3;TPOX:8;vWA:16,18;
同工酶
染色體 67~74
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-RAMP-1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MK1/MAPKK1抗體(N-端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型(抗體) Anti-ADAM-TS1/METH1 0.1ml
ZBTB42 英文名稱: 鋅指蛋白925抗體 0.2ml
DTX2 英文名稱: 鋅離子結(jié)合蛋白DTX2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-FER/TYK3(Tyr402) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶3抗體 規(guī)格 0.1ml
MK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MK1/MAPKK1抗體(N-端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TSLP(Human thymic stromal lymphopoietin) ELISA Kit 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GABABR1 gamma氨基丁酸B型受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
MSTN(rat Myostatin) ELISA Kit 大鼠肌抑素 ELISA 試劑盒 96T
SP-B 英文名稱: 肺表面活性蛋白B抗體 0.1ml
CHURC1 英文名稱: 神經(jīng)誘導(dǎo)胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Churchill抗體 0.2ml
Anti-GABABR1 gamma氨基丁酸B型受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人Janus激酶3(JAK3)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒,英文名:CTXⅠ ELISA KiISA Kit for Human Fibroblast growth factor receptor 1小鼠凝血因子Ⅷ(F8)ELISA試劑盒,英文名:F8 ELISA Kit人骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白2(GREM2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠結(jié)合珠蛋白(Hpt)ELISA試劑盒,英文名:Hpt ELISA KiISA Kit for Human Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase小鼠胱天蛋白酶1(CASP1)ELISA試劑盒,英文名:CASP1 ELISA Kit人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠毒蕈堿型膽堿受體M3(CHRM3)ELISA試劑盒,英文名:CHRM3 ELISA KiISA Kit for Human Interferon alpha-2小鼠白細(xì)胞衍生趨化因子1(LECT1)ELISA試劑盒,英文名:LECT1 ELISA Kit人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠Slit同源物1(Slit1)ELISA試劑盒,英文名:Slit1 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase LMTK3大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒,英文名:MUC5B ELISA KiISA Kit for Human Interferon alpha-1/13小鼠Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)ELISA試劑盒,英文名:CTXⅢ ELISA Kit人LIM同源框轉(zhuǎn)錄因子1-beta ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠脂蛋白脂肪酶(LPL)ELISA試劑盒,英文名:LPL ELISA KiISA Kit for Human Lutropin subunit beta大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒,英文名:Fbg ELISA Kit人黑色素瘤相關(guān)抗原C1(Melanoma-associated antigen C1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胃蛋白酶(PG)ELISA試劑盒,英文名:PG ELISA KiISA Kit for Human Myosin-11大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒,英文名:NGF ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒人96T93.75-6000 pg/mL大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒,英文名:BDNF ELISA Kit
免疫組化染色孵育盒(小) 個(gè) 可容納6張切片
WNT2 英文名稱: 信號(hào)通路Wnt2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDH2 (Tyr820) 磷酸化N-鈣粘附分子抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DZIP3 英文名稱: RNA結(jié)合泛素連接酶DZIP3抗體 0.2ml
Anti-AD7C-NTP 神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VA(Human Vitamin A) ELISA Kit 人維生素AMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HER3/ErbB3 HER3受體抗體 規(guī)格 0.2ml
ACA-IgM(Mouse anti-cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit 小鼠抗心磷脂抗體IgM 96T
PPP2R2B/PP2A-B55 英文名稱: 蛋白質(zhì)磷酸酶2A-B55抗體 0.2ml
C9orf96 英文名稱: 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框96抗體 0.2ml
Anti-Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml