詳細(xì)介紹
人乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-453價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-453價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系由Cailleau R在1976年從一名48歲的患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的白人女性的心包滲出液中分離建立的。該細(xì)胞表達(dá)FGF的受體。
培養(yǎng)條件 L15:
Leibovitz Medium 10%FBS
傳代方法 1:2~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:15,20;D19S433:13,14;D21S11:29,31;D2S1338:23,24;D3S1358:15,OL;D5S818:11;D7S820:10;D8S1179:10,12;FGA:18,23;TH01:6;TPOX:10;vWA:17,18;
同工酶
染色體 72~90
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti- Beta-HCG/Gold 膠體金離子標(biāo)記小鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素單抗IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
芳香化酶抗體 Anti-Aromatase 0.1ml
ZNF473 英文名稱: 鋅指蛋白473抗體 0.2ml
DNA Ligase IV 英文名稱: DNA連接酶4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體 規(guī)格 0.1ml
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TXB2(Human Thromboxane B2) ELISA Kit 人血栓素B2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-lamin C 核纖層蛋白C抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch樣蛋白14抗體 規(guī)格 0.2ml
Inhbb(Human inhibin beta-B) ELISA Kit 人抑制素β-B 96T
Protein S 英文名稱: 蛋白S抗體 0.2ml
CDCA7L 英文名稱: 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 0.2ml
Anti-lamin C 核纖層蛋白C抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒,英文名:ABCG2 ELISA KiISA Kit for Human C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒,英文名:PAL ELISA Kit人鈣調(diào)素(RC)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠激活素A(Activin A)ELISA試劑盒,英文名:Activin A ELISA KiISA Kit for Human Sulfotransferase 1A1大鼠乙酰輔酶A羧化酶α(ACACα)ELISA試劑盒,英文名:ACACα ELISA Kit人生長抑素受體2(SSTR2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA試劑盒,英文名:SEPP1 ELISA KiISA Kit for Human Gamma-synuclein大鼠神經(jīng)疾病靶標(biāo)酯酶(NTE)ELISA試劑盒,英文名:NTE ELISA Kit人S100鈣結(jié)合蛋白A16ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒,英文名:PCK1 ELISA Kit
人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒,英文名:f-βCG ELISA KiISA Kit for Human Transcription termination factor 2大鼠饑餓素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)ELISA試劑盒,英文名:GHRL ELISA KiISA試劑盒人TM4SF20蛋白人96T0.312-20 ng/mL大鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白(ARNTL)ELISA試劑盒,英文名:ARNTL ELISA KiISA Kit for Human Von Hippel-Lindau disease tumor suppressor大鼠補(bǔ)體成分4(C4)ELISA試劑盒,英文名:C4 ELISA Kit大鼠VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA試劑盒,英文名:VCC1 ELISA Kit大鼠10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)ELISA試劑盒,英文名:IP10 ELISA Kit豚鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒,英文名:CRP ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
VE Cadherin 英文名稱: 上皮型鈣粘附分子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-cdc2 (Ser39) 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
IRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干擾素調(diào)節(jié)因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DREF 英文名稱: DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體 0.2ml
Anti-ADNP/NAP 活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Egr-1/FITC 熒光素標(biāo)記早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-MMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C2orf44 2號染色體開放閱讀框44抗體 規(guī)格 0.2ml
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mg
H2BFM 英文名稱: H2B組蛋白家族M蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SAMD15/C14orf174 14號染色體開放閱讀框174 規(guī)格 0.2ml
Anti-MMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml