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詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一無精癥男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1：
2傳代；5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
apo-A1(Mouse apoprotein) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白A1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CT-1/CTF1/FITC 熒光素標(biāo)記心肌營養(yǎng)素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DDX43/CT13 /抗原13抗體 規(guī)格 0.2ml
Avidin/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記親合素 0.1ml
DIF14 英文名稱： 分化相關(guān)基因14抗體 0.2ml
四環(huán)素單克隆抗體 小鼠單抗 0.05
Anti-CT-1/CTF1/FITC 熒光素標(biāo)記心肌營養(yǎng)素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Caspase-13/4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCNP PEST含核蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
VWF Kit Human 人 vWF / von Willebrand Factor ELISA配對抗體 ELISA
phospho-Tau protein(Ser202) 英文名稱： 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
CBP 英文名稱： CREB結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
Anti-Caspase-13/4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人補(bǔ)體成分9(C9)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL.小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒，英文名：TIMP-4 ELISA Kit人ATP-結(jié)合盒亞家族B成員5 (ABCB5)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒，英文名：IAA ELISA Kit人芳烴受體(Ah receptor)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠髓樣分化因子88(MyD88)ELISA試劑盒，英文名：MyD88 ELISA Kit人雙糖鏈蛋白多糖(Biglycan)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠磷脂酶D2(PLD2)ELISA試劑盒，英文名：PLD2 ELISA Kit人細(xì)胞色素B5(Cytochrome b5)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒，英文名：NF-κB p65 ELISA Kit人檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒，英文名：PK ELISA Kit人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒，英文名：Flt3 ELISA Kit
ELISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒，英文名：GAPDH/G3PDH ELISA Kit二酰基甘油（Diacylglycerol）ELISA試劑盒通用96T0.625-40 ng/mL小鼠CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒，英文名：FKN/CX3CL1 ELISA Kit人外NOx硫硫醇交換器2(ENOX2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠血管生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒，英文名：ANGPT2 ELISA Kit人胃調(diào)理蛋白(GT)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠生長分化因子3(GDF3)ELISA試劑盒，英文名：GDF3 ELISA Kit人胰高血糖素樣肽1受體(GLP1R) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠絡(luò)絲蛋白(RL)ELISA試劑盒，英文名：RL ELISA Kit羥脯氨酸(Hydroxyproline)ELISA試劑盒通用96T62.5-4000 nmol/L小鼠歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒，英文名：HCAM ELISA Kit人70kDa熱休克蛋白4ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠促泌素(SCGN)ELISA試劑盒，英文名：SCGN ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
WDR61 英文名稱： WD重復(fù)膜蛋白61抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDK5(Tyr15) 磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DOCK2 英文名稱： 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白2抗體 0.2ml
Anti-F-Actin 纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CC16(Mouse Clara cell protein) ELISA Kit 小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CGRP/FITC 熒光素標(biāo)記降鈣素基因相關(guān)肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Dog IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格 0.1ml
AACT/RBITC 羅丹明標(biāo)記胰糜蛋白酶 0.3ml
LRIG3 英文名稱： LRIG3抗體 0.2ml
磺胺類多殘留檢測卡 50T/盒 水產(chǎn)、蜂蜜、飼料等
Anti-CGRP/FITC 熒光素標(biāo)記降鈣素基因相關(guān)肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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