詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱(chēng) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
銜接蛋白α抗體 Anti-alpha Adaptin/AP1 0.1ml
ZBTB26 英文名稱(chēng): 鋅指蛋白481抗體 0.2ml
DGCR6 英文名稱(chēng): 無(wú)胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵基因6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK1(Thr197/Thr202) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
UGT2B4(Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polypeptide B4) ELISA Kit 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細(xì)胞核抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HN protein 雞新城疫血凝素-神經(jīng)氨酸酶抗體 規(guī)格 1ml
CH ELISA Kit (Mouse cholest) 小鼠膽固醇ELISA試劑盒 96T
Plastin L 英文名稱(chēng): 淋巴細(xì)胞胞漿蛋白LCP1抗體 0.2ml
CT26 英文名稱(chēng): /抗原26抗體 0.2ml
Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細(xì)胞核抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF-4)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠尿皮質(zhì)素3(UCN3)ELISA試劑盒,英文名:UCN3 ELISA KiISA Kit for Human Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒,英文名:DHEA ELISA KiISA Kit for Human Myelin-oligodendrocyte glycoprotein大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒,英文名:F1+2 ELISA KiISA Kit for Human Neurotensin/neuromedin N大鼠緊密連接蛋白(Ocln)ELISA試劑盒,英文名:Ocln ELISA KiISA Kit for Human Periaxin大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒,英文名:SCFR ELISA KiISA Kit for Human Peroxiredoxin-6大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒,英文名:ALCAM ELISA KiISA Kit for Human Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9大鼠CD44分子(CD44)ELISA試劑盒,英文名:CD44 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Glucosylceramidase小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)ELISA試劑盒,英文名:FGF2 ELISA KiISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein D大鼠早老素2(PS2)ELISA試劑盒,英文名:PS2 ELISA KiISA Kit for Human Synaptophysin大鼠銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)ELISA試劑盒,英文名:SOD4 ELISA KiISA Kit for Human Sphingosine 1-phosphate receptor 2大鼠內(nèi)皮素受體A(ETRA)ELISA試劑盒,英文名:ETRA ELISA KiISA Kit for Human Trem-like transcript 1 protein大鼠核連蛋白1(NUCB1)ELISA試劑盒,英文名:NUCB1 ELISA KiISA Kit for Human Ubiquitin-associated protein 2大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒,英文名:FGFR1 ELISA Kit大鼠Podocin蛋白(PDCN)ELISA試劑盒,英文名:PDCN ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
ZW10 peptide 英文名稱(chēng): 著絲粒蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser517) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DDB1 英文名稱(chēng): DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
CSF2RA CD116 / GM-CSFR 鼠單抗 (PE) Human
25(OH)D3/25 HVD3(Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3) ELISA Kit 小鼠25羥基維生素D3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CSMD1/FITC 熒光素標(biāo)記抑癌基因CSMD1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DDX19B/DBP5 解旋酶DEAD5抗體 規(guī)格 0.1ml
AACT/APC 熒光素APC標(biāo)記胰糜蛋白酶 0.1ml
LACE1 英文名稱(chēng): 泌乳升高蛋白1抗體 0.2ml
磺胺對(duì)甲氧嘧啶單克隆抗體 小鼠單抗 0.1
Anti-CSMD1/FITC 熒光素標(biāo)記抑癌基因CSMD1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml