詳細(xì)介紹
人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B價格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細(xì)胞。 這些細(xì)胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆。 DEAS-2B細(xì)胞保留了對血清反應(yīng)進行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導(dǎo)或影響分化及致癌的化學(xué)或生物制劑。 細(xì)胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。
培養(yǎng)條件
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(39+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-LEF-1/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴增強因子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CCDC129 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體 規(guī)格 0.2ml
GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗原 0.5mg
Adenovirus hexon protein 英文名稱: 腺病毒六鄰體蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh sLOX 1 可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-LEF-1/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴增強因子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VWF ELISA Kit 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-WDR26 心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GABBR2/GB2 G氨基丁酸B型受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit 小鼠催產(chǎn)素 96T
hydrogen exchanger 3 英文名稱: 鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 0.2ml
ARP2 英文名稱: 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3抗體 0.2ml
Anti-WDR26 心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人線粒體鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶(OAT)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(CTnⅠ)ELISA試劑盒,英文名:CTnⅠ ELISA KiISA Kit for Human Programmed cell death protein 1大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒,英文名:E-Cad ELISA KiISA Kit for Human Renin大鼠脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)ELISA試劑盒,英文名:ADIPOR2 ELISA KiISA Kit for Human Semaphorin-3F大鼠胃動蛋白1(GKN1)ELISA試劑盒,英文名:GKN1 ELISA KiISA Kit for Human Transcription factor SOX-18大鼠凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒,英文名:GS ELISA KiISA Kit for Human THAP domain-containing protein 4大鼠花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)ELISA試劑盒,英文名:ALOX15 ELISA KiISA Kit for Human Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP3)ELISA試劑盒,英文名:MCP3 ELISA Kit
人蛋白酪氨酸磷酸酶F受體(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase F)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒,英文名:Resistin ELISA Kit大鼠Smoothelin蛋白(SMTN)ELISA試劑盒,英文名:SMTN ELISA Kit豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒,英文名:IL1Ra ELISA KiISA Kit for Human Aldehyde oxidase小鼠血纖蛋白原γ鏈(FGG)ELISA試劑盒,英文名:FGG ELISA KiISA Kit for Human Alpha-1B-glycoprotein小鼠神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1(NCAM1)ELISA試劑盒,英文名:NCAM1 ELISA KiISA Kit for Human Beta-endorphin小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒,英文名:Gzms-B ELISA KiISA Kit for Human Carboxylesterase 5A小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA試劑盒,英文名:GAD-Ab-IgM ELISA Kit
羊抗雞IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
XIAP 英文名稱: X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-c-Kit(Tyr721) 磷酸化原癌基因c-kit抗體 規(guī)格 0.1ml
Histone H1b(Histone H1.4) 組蛋白H1b抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DNA PKcs 英文名稱: DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體 0.2ml
Anti-5-HTR2A 5-羥色胺受體2A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-S6PDH/FITC 熒光素標(biāo)記抗6-磷酸山梨醇脫氫酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) 海葵神經(jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1mg
基質(zhì)金屬蛋白酶-2抗體 Anti-MMP-2 0.1ml
14-3-3 zeta+delta 英文名稱: 14-3-3 protein ζ/δ抗體 0.1ml
human Fibrinogen 英文名稱: 羊抗人纖維蛋白原抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-PDHA1(Ser293) 磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 規(guī)格 0.1ml
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) ??窠?jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1mg