細胞名稱  人葡萄膜黑色素細胞；UM培養(yǎng)
形態(tài)特性 多角

品牌 貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件 F12：

Ham's F12 Nutrient Mixture 10%FBS；bFGF,霍亂毒素,異丁基甲基黃嘌呤IBMX4.4mg/200ml  

傳代方法 1：

3傳代；3~4天1次。  

傳代情況 P5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：10，11；D16S539：9，11，12；D18S51：13，15，16；D19S433：13，16.2；D21S11：28，30，31.2；D2S1338：17，OL，19，22；D3S1358：15；D5S818：9，11；D7S820：10，11，12；D8S1179：10，12，14；FGA：24；TH01：9，9.3；TPOX：9，11；vWA：17，18；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
人葡萄膜黑色素細胞；UM培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
SDPR(human serum deprivation response) ELISA Kit 人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Protein G 重組蛋白G抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HDHD1 HDHD1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

AQP-1 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1 96T

4 英文名稱： 腦特異性多肽蛋白19抗體 0.1ml

CAMSAP1 英文名稱： 鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

Anti-Protein G 重組蛋白G抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠Smad7 ELISA Kit 大鼠Smad7Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-TRAF6 壞死因子受體相關(guān)因子6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh GK5/Glycerokinase 5 甘油激酶5抗體 規(guī)格 0.2ml

TAFI ELISA Kit 大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物 96T

NDUFA9 英文名稱： NDUFA9蛋白抗體 0.2ml

beta Amyloid 1-42 英文名稱： β淀粉樣肽(1-42)抗體 0.1ml

Anti-TRAF6 壞死因子受體相關(guān)因子6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人轉(zhuǎn)錄因子AP-1(Transcription factor AP-1) ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒，英文名：PⅠNP ELISA KiISA Kit for Human Netrin receptor UNC5C大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)ELISA試劑盒，英文名：PKCγ ELISA Kit人無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素20(IL20)ELISA試劑盒，英文名：IL20 ELISA Kit大鼠CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒，英文名：CD40L ELISA Kit豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒，英文名：FSH ELISA Kit醛固酮(Aldosterone)ELISA試劑盒通用96T0.39-25 ng/mL小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ1)ELISA試劑盒，英文名：TGFβ1 ELISA KiISA Kit for Human cAMP-dependent transcription factor ATF-2小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒，英文名：PF-3 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Latent-transforming growth factor beta-binding protein 4大鼠蔗糖酶異麥芽糖酶(SI)ELISA試劑盒，英文名：SI ELISA Kit人血小板解整合素樣金屬蛋白酶20(ADAMTS20)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒，英文名：Hepc ELISA KiISA Kit for Human Aquaporin-4小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒，英文名：PAP ELISA Kit人殺菌性通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒，英文名：sMHC-1 ELISA Kit人白介素25(IL25/C19orf10)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒，英文名：BMPR-Ⅱ ELISA Kit人胱硫醚γ裂解酶 (Cystathionine gamma-lyase)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒，英文名：IL-33 ELISA Kit人歸巢相關(guān)細胞黏附分子/CD44分子(HCAM/CD44)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠B細胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒，英文名：BAFF ELISA Kit
預(yù)染蛋白Marker分子量標準(10-250kDa) 10次 MBI分裝

ZNF230 英文名稱： 鋅指蛋白230抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Dab1 (Ser491) 磷酸化Disabled 1抗體 規(guī)格 0.1ml

GFP (Green Fluorecent protein) 綠色熒光蛋白多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DACH1 英文名稱： 細胞命運決定因子DACH1抗體 0.2ml

GOLM1 GOLM1 / GP73 鼠單抗 (FITC) Human
Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit 人軟骨糖蛋白39Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-MYPT1 (Thr853) 磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgM/Gold 膠體金標記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格 0.5ml

(Mouse mammary carcinoma Marker-CA153) ELISA Kit 小鼠癌標志物-CA153 96T

Neurotrimin 英文名稱： 神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體 0.2ml

BAG2 英文名稱： Bcl-2結(jié)合抑凋亡蛋白2抗體 0.1ml

Anti-Phospho-MYPT1 (Thr853) 磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。