技術(shù)文章
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)elisa試劑盒樣本處理及要求
閱讀:155 發(fā)布時間:2021-9-14小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)elisa試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到
100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞
rCSC, 大鼠心肌細胞
RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞
RLFs, 大鼠肺成纖維細胞
rCF, 大鼠心臟成纖維細胞
細胞名稱
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞
CSC, 小鼠心肌細胞
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞
MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞
mCF, 小鼠心臟成纖維細胞
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
細胞名稱
人絨毛膜毛細血管內(nèi)皮細胞
人羊膜上皮細胞
人絨毛間充質(zhì)成纖維細胞
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞