詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Streptobacillus moniliformisPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
乙型肝炎病毒基因分型PCR測定試劑盒
乙型脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測試劑盒
乙型流感病毒PCR檢測試劑盒
乙型腦炎病毒PCR檢測試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
犬腎細(xì)胞;MDCK/IgRDL-甲硫;蛋質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDL-Mine
RK3 Others Human kC / RK3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-天冬質(zhì)量規(guī)格:0.98DL-Aspartic acid
CL-0264C918(眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2DL-質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Glutamine
HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-beta-苯丙(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-beta-Phenylalanine
小鼠上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mLDL-肉堿鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Carnitine
小鼠免疫球蛋白樣EGF樣域酪酸1(Tie1)ELISA試劑盒 ,英文名: Tie1 ELISA Kit
人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)ELISA檢測試劑盒HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISAKit 96T/48T
大鼠胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒 Rat Insulin-like Growth Factors 1 Receptor,IGF-1R ELISA Kit
英文名稱Human15-lipoxygenaseELISAKit人15-脂加氧酶(15-LO)規(guī)格:96T/48T
糞便細(xì)胞DNA分離試劑盒50次
ELISAKitAIL-R1人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1規(guī)格:48T/96T
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒PSCA (Prostate Stem Cell Anti-gen) 前列腺干細(xì)胞抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Phospho-CDK2 (Thr160) 0酸化周期素依賴性2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh OLFM4 凋亡蛋白OLFM44抗體 規(guī)格 0.2ml
IFNAR1 Kit Human 人 IFNAR1 / IFNAR ELISA配對抗體 ELISA
TCEB3 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體 0.1m
M Cadherin 英文名稱: M鈣粘附分子抗體 0.1ml
Anti-Phospho-CDK2 (Thr160) 0酸化周期素依賴性2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。