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產(chǎn)品名稱:肺微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X9974
產(chǎn)品分類:細胞培養(yǎng)基
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
兔免疫球蛋白G2(IgG2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔核孔蛋白214kda(NUP214)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔血管緊張肽A(ATA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔成纖維細胞生長因子21(FGF21)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔成纖維細胞生長因子受體2(FGFR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔粘蛋白13(MUC13)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔甲胎蛋白(αFP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔胸苷酸合成(TS/TYMS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔II型前膠原羧基端原肽(PIICP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔抗生長抗體(GHAb)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
兔γ谷氨酰半合成(γ-ECS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
肺微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基90332-66-47-木糖基- 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
641-39-4槐定 規(guī)格: 20mg
35554-44-0抑霉唑;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
67979-25-3橙黃決明 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
人參皂Rg3 規(guī)格: 20mg
288847-34-7OXi4503 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
2237-36-74-甲氧基楊 規(guī)格: 20mg
106758-54-7決明蒽醌;美決明子 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
20(R)人參皂Rg3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
88150-47-4馬來氨地平 規(guī)格: 100mg
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。