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Aurora激酶C(AURKC)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-31 13:07:51瀏覽次數(shù):273

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研實(shí)驗(yàn)
英文名稱 Recombinant Aurora Kinase C (AURKC) 物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源 原核表達(dá) 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
Aurora激酶C(AURKC)重組蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品:芳香酶(ARO)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 木糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅱ(XYLT2)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 前列腺素D合酶(PTGDS)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源;

詳細(xì)介紹

樣品要求:

1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請?zhí)崆皹?biāo)注說明。

2、待標(biāo)記樣品最小標(biāo)記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于1mg/ml

3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉成分。

4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點(diǎn)、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。

5、請?zhí)崆罢f明任何特殊情況。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱:Aurora激酶C(AURKC)重組蛋白

 英文名稱:Recombinant Aurora Kinase C (AURKC)

AIE2; AIK3; AurC; STK13; ARK-3; Aurora-C; Serine/Threonine-Protein Kinase 13; Aurora/IPL1-related kinase 3; Aurora/IPL1/Eg2 protein 2; Serine/threonine-protein kinase aurora-C

酶與激酶 生殖科學(xué) 發(fā)育科學(xué)

物種:Rattus   norvegicus (Rat,大鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測分子量:-

實(shí)際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性狀:凍干粉

純度:>   97%

等電點(diǎn):-

應(yīng)用:Positive   Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

 

相關(guān)產(chǎn)品:

腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉

硫氧還蛋白還原酶1(TXNRD1)重組蛋白 物種; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉

蛋白激酶D1(PKD1)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉

特性

重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,-80條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因?yàn)槿芙獠缓脮?huì)降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題。

(1)原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護(hù)劑,使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100 μg,86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩或劇烈搖晃。

(2)真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進(jìn)行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進(jìn)行,如哺乳動(dòng)物細(xì)胞能夠識(shí)別和去除基因中的內(nèi)含子,對(duì)翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,這樣表達(dá)的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

(3)類固醇還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護(hù)劑。在凍干和儲(chǔ)存過程中常用的保護(hù)劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護(hù)劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護(hù)劑和填充劑。

操作步驟:

實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4離心5 min

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融。

培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL0.5 mL

5.置于4搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min

6 14,000rpm,4離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融

枯草芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Bacillus subtilisPCR

堪薩斯分枝桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Mycobacterium kansasiiPCR

杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Germiston VirusRTPCR

寄生曲霉PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Aspergillus parasiticusPCR

Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(人:N端多肽)、內(nèi)臟脂肪素、 又稱:前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-ICAM-3/CD50 細(xì)胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh P2Y4 P2Y4受體抗體 規(guī)格 0.1ml

CD86 Kit Rat 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

T2R60 英文名稱: 味覺受體蛋白家族2亞基60抗體 0.2ml

C3orf26 英文名稱: 3號(hào)染色體開放閱讀框26抗體 0.2ml

Anti-ICAM-3/CD50 細(xì)胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Aurora激酶C(AURKC)重組蛋白單端孢霉屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trichothecium spp.PCR

登革病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Dengue Virus(DENV)4RTPCR

狄斯瓦螨PCR檢測試劑盒 英文名稱; Varroa destructorPCR

東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Eastern Equine Encephalomyelitis Virus(EEEV )RTPCR

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。


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